M14

La línea celular M14 es una línea celular de melanoma humano derivada de una lesión cutánea metastásica de un paciente adulto con melanoma. Esta línea celular se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer, particularmente en el estudio de la biología del melanoma, la progresión tumoral y la evaluación de posibles agentes terapéuticos. Las células M14 presentan características típicas del melanoma maligno, incluida la capacidad de formar tumores en ratones inmunodeprimidos, lo que las convierte en una herramienta valiosa para estudios in vivo, además de para experimentos in vitro.

En cuanto a sus características moleculares, se ha informado que las células M14 presentan mutaciones en genes que suelen alterarse en el melanoma, incluido el gen BRAF. Específicamente, las células M14 albergan la mutación BRAF V600E, la cual conduce a la activación constitutiva de la vía de señalización MAPK/ERK, lo que promueve la proliferación y la supervivencia celular. Esto convierte a la línea M14 en un modelo importante para estudiar terapias dirigidas, como los inhibidores de BRAF, diseñadas para aprovechar esta mutación. Además, las células M14 se han utilizado en la investigación de inmunoterapia debido a su expresión de diversos antígenos asociados al melanoma y a su susceptibilidad a la modulación del sistema inmunológico.

Los investigadores que utilicen la línea celular M14 deben tener en cuenta que estas células no son adecuadas para aplicaciones terapéuticas y están destinadas exclusivamente a fines de investigación, en particular aquellos centrados en la fisiopatología del melanoma, el cribado de fármacos y el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas. La línea celular M14 sigue siendo un recurso clave para avanzar en nuestra comprensión del melanoma y explorar nuevas vías de tratamiento.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.