Langsung ke isi
M14
Tisu
Kulit
Penyakit
Melanoma amelanotik
Lokasi metastasis
Bokong kanan, hipodermis
Sinonim
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

M14

Cell line · Nomor produk 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel M14 adalah garis sel melanoma manusia yang berasal dari lesi kulit metastasis pasien dewasa dengan melanoma. Garis sel ini banyak digunakan dalam penelitian kanker, khususnya dalam studi biologi melanoma, perkembangan tumor, dan evaluasi agen terapeutik potensial. Sel M14 menunjukkan karakteristik khas melanoma ganas, termasuk kemampuan untuk membentuk tumor pada tikus yang mengalami gangguan kekebalan, sehingga menjadikannya alat yang berharga untuk penelitian in vivo selain eksperimen in vitro.

Dalam hal fitur molekuler, sel M14 telah dilaporkan membawa mutasi pada gen yang sering berubah pada melanoma, termasuk gen BRAF. Secara khusus, sel M14 memiliki mutasi BRAF V600E, yang mengarah pada aktivasi konstitutif jalur pensinyalan MAPK / ERK, yang mendorong proliferasi dan kelangsungan hidup sel. Hal ini menjadikan M14 sebagai model penting untuk mempelajari terapi yang ditargetkan, seperti inhibitor BRAF, yang dirancang untuk mengeksploitasi mutasi ini. Selain itu, sel M14 telah digunakan dalam penelitian imunoterapi karena ekspresinya terhadap berbagai antigen terkait melanoma dan kerentanannya terhadap modulasi sistem kekebalan tubuh.

Para peneliti yang menggunakan garis sel M14 harus memperhatikan bahwa sel-sel ini tidak cocok untuk aplikasi terapeutik dan hanya ditujukan untuk tujuan penelitian, terutama yang berfokus pada patofisiologi melanoma, skrining obat, dan pengembangan strategi terapeutik baru. Garis sel M14 tetap menjadi sumber daya utama untuk memajukan pemahaman kita tentang melanoma dan mengeksplorasi jalan baru untuk pengobatan.

Tisu
Kulit
Penyakit
Melanoma amelanotik
Lokasi metastasis
Bokong kanan, hipodermis
Sinonim
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti fibroblast

04Pengidentifikasi

Referensi
M14 (Nomor katalog Cytion 302163)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1395

05Penanganan dan budidaya

Media kultur
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS yang dinonaktifkan dengan panas
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

07Donatur

Usia donor
33
Etnis
Eropa