Μετάβαση στο περιεχόμενο
M14
Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Αμελανωτικό μελάνωμα
Θέση μετάστασης
Δεξιός γλουτός, υποδερμίδα
Συνώνυμα
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

Έγγραφα

M14

Cell line · Αριθμός προϊόντος 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά M14 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά μελανώματος που προέρχεται από μια μεταστατική δερματική βλάβη ενός ενήλικου ασθενούς με μελάνωμα. Αυτή η κυτταρική σειρά χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο, ιδίως στη μελέτη της βιολογίας του μελανώματος, της εξέλιξης του όγκου και της αξιολόγησης πιθανών θεραπευτικών παραγόντων. Τα κύτταρα M14 παρουσιάζουν χαρακτηριστικά τυπικά του κακοήθους μελανώματος, συμπεριλαμβανομένης της ικανότητας σχηματισμού όγκων σε ανοσοκατεσταλμένα ποντίκια, γεγονός που τα καθιστά πολύτιμο εργαλείο για in vivo μελέτες εκτός από τα in vitro πειράματα.

Όσον αφορά τα μοριακά χαρακτηριστικά, έχει αναφερθεί ότι τα κύτταρα M14 φέρουν μεταλλάξεις σε γονίδια που μεταβάλλονται συχνά στο μελάνωμα, συμπεριλαμβανομένου του γονιδίου BRAF. Συγκεκριμένα, τα κύτταρα M14 φέρουν τη μετάλλαξη BRAF V600E, η οποία οδηγεί σε συστατική ενεργοποίηση του σηματοδοτικού μονοπατιού MAPK/ERK, προωθώντας τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και την επιβίωση. Αυτό καθιστά το M14 ένα σημαντικό μοντέλο για τη μελέτη στοχευμένων θεραπειών, όπως οι αναστολείς του BRAF, που έχουν σχεδιαστεί για να εκμεταλλεύονται αυτή τη μετάλλαξη. Επιπλέον, τα κύτταρα M14 έχουν χρησιμοποιηθεί στην έρευνα για την ανοσοθεραπεία λόγω της έκφρασης διαφόρων αντιγόνων που σχετίζονται με το μελάνωμα και της ευαισθησίας τους στη διαμόρφωση του ανοσοποιητικού συστήματος.

Οι ερευνητές που χρησιμοποιούν την κυτταρική σειρά M14 θα πρέπει να σημειώσουν ότι τα κύτταρα αυτά δεν είναι κατάλληλα για θεραπευτικές εφαρμογές και προορίζονται αποκλειστικά για ερευνητικούς σκοπούς, ιδίως εκείνους που εστιάζουν στην παθοφυσιολογία του μελανώματος, στον έλεγχο φαρμάκων και στην ανάπτυξη νέων θεραπευτικών στρατηγικών. Η κυτταρική σειρά M14 παραμένει ένας βασικός πόρος για την προώθηση της κατανόησης του μελανώματος και τη διερεύνηση νέων οδών για τη θεραπεία.

Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Αμελανωτικό μελάνωμα
Θέση μετάστασης
Δεξιός γλουτός, υποδερμίδα
Συνώνυμα
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ινοβλάστες που μοιάζουν με ινοβλάστες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
M14 (αριθμός καταλόγου Cytion 302163)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1395

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το θρεπτικό μέσο με 10% θερμικά αδρανοποιημένο FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
33
Εθνικότητα
Ευρωπαϊκό