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M14
Tissue
皮膚
Disease
無色素性黑色素瘤
Metastatic site
右臀部,皮下組織
Synonyms
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

Documents

M14

Cell line · Product number 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

M14 細胞系是一種源自一名成人黑色素瘤患者轉移性皮膚病變的人類黑色素瘤細胞系。 該細胞系廣泛應用於癌症研究,特別是在黑色素瘤生物學、腫瘤進展的研究,以及潛在治療藥物的評估方面。M14 細胞展現出惡性黑色素瘤的典型特徵,包括能在免疫缺陷小鼠體內形成腫瘤的能力,這使得它們除了用於體外實驗外,也是進行體內研究的寶貴工具。

就分子特徵而言,已有研究指出 M14 細胞攜帶黑色素瘤中常見的基因突變,包括 BRAF 基因。具體而言,M14 細胞攜帶 BRAF V600E 突變,此突變會導致 MAPK/ERK 訊號傳導路徑的持續活化,從而促進細胞增殖與存活。 這使得 M14 成為研究針對性療法(例如旨在利用此突變的 BRAF 抑制劑)的重要模型。此外,由於 M14 細胞表達多種與黑色素瘤相關的抗原,且易受免疫系統調控,因此也被應用於免疫療法研究中。

使用 M14 細胞系的研究人員應注意,這些細胞不適合用於治療應用,僅供研究用途,特別是針對黑色素瘤病理生理學、藥物篩選以及新治療策略開發的研究。M14 細胞系仍是深化我們對黑色素瘤的理解並探索新治療途徑的關鍵資源。

Tissue
皮膚
Disease
無色素性黑色素瘤
Metastatic site
右臀部,皮下組織
Synonyms
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
成纖維細胞樣

04Identifiers

Citation
M14(Cytion 型號 302163)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1395

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640,含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 經熱滅活的胎牛血清
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

07Donor

Donor age
33
Ethnicity
歐洲的