Gå direkte til indholdet
M14
Væv
Hud
Sygdom
Amelanotisk melanom
Metastasested
Højre balle, hypodermis
Synonymer
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

Dokumenter

M14

Cell line · Varenummer 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

M14-cellelinjen er en human melanomcellelinje, der stammer fra en metastatisk hudlæsion hos en voksen patient med melanom. Denne cellelinje bruges i vid udstrækning til kræftforskning, især til undersøgelse af melanomets biologi, tumorprogression og evaluering af potentielle terapeutiske midler. M14-celler udviser karakteristika, der er typiske for malignt melanom, herunder evnen til at danne tumorer i immunkompromitterede mus, hvilket gør dem til et værdifuldt værktøj til in vivo-undersøgelser ud over in vitro-eksperimenter.

Med hensyn til molekylære egenskaber er det blevet rapporteret, at M14-celler bærer mutationer i gener, der ofte ændres i melanom, herunder BRAF-genet. Specifikt har M14-celler BRAF V600E-mutationen, som fører til konstitutiv aktivering af MAPK/ERK-signalvejen, hvilket fremmer celleproliferation og -overlevelse. Det gør M14 til en vigtig model for studier af målrettede behandlinger, såsom BRAF-hæmmere, der er designet til at udnytte denne mutation. Derudover er M14-celler blevet brugt i forskning i immunterapi på grund af deres udtryk for forskellige melanom-associerede antigener og modtagelighed for modulering af immunsystemet.

Forskere, der bruger M14-cellelinjen, skal være opmærksomme på, at disse celler ikke er egnede til terapeutiske anvendelser og udelukkende er beregnet til forskningsformål, især dem, der fokuserer på melanompatofysiologi, lægemiddelscreening og udvikling af nye terapeutiske strategier. M14-cellelinjen er fortsat en vigtig ressource til at fremme vores forståelse af melanom og udforske nye behandlingsmuligheder.

Væv
Hud
Sygdom
Amelanotisk melanom
Metastasested
Højre balle, hypodermis
Synonymer
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Fibroblast-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
M14 (Cytion katalognummer 302163)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1395

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10 % varmeinaktiveret FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
33
Etnisk tilhørsforhold
Europæisk