Skip to content
M14
Tissue
Da
Disease
Ung thư hắc tố không có sắc tố
Metastatic site
Mông phải, lớp dưới da
Synonyms
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

Documents

M14

Cell line · Product number 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào M14 là một dòng tế bào u hắc tố người được phân lập từ một tổn thương da di căn của một bệnh nhân trưởng thành mắc u hắc tố. Dòng tế bào này được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu ung thư, đặc biệt trong việc nghiên cứu sinh học của ung thư hắc tố, tiến triển khối u và đánh giá các tác nhân điều trị tiềm năng. Tế bào M14 có các đặc điểm điển hình của ung thư hắc tố ác tính, bao gồm khả năng hình thành khối u ở chuột suy giảm miễn dịch, khiến chúng trở thành công cụ quý giá cho các nghiên cứu in vivo ngoài các thí nghiệm in vitro.

Về đặc điểm phân tử, các tế bào M14 được báo cáo là mang các đột biến trong các gen thường bị biến đổi trong ung thư hắc tố, bao gồm gen BRAF. Cụ thể, các tế bào M14 mang đột biến BRAF V600E, dẫn đến kích hoạt liên tục của con đường tín hiệu MAPK/ERK, thúc đẩy sự phát triển và tồn tại của tế bào. Điều này khiến M14 trở thành mô hình quan trọng để nghiên cứu các liệu pháp nhắm mục tiêu, như ức chế BRAF, được thiết kế để khai thác đột biến này. Ngoài ra, tế bào M14 đã được sử dụng trong nghiên cứu miễn dịch trị liệu do khả năng biểu hiện các kháng nguyên liên quan đến u hắc tố và tính nhạy cảm với sự điều hòa của hệ miễn dịch.

Các nhà nghiên cứu sử dụng dòng tế bào M14 cần lưu ý rằng các tế bào này không phù hợp cho các ứng dụng điều trị và chỉ được sử dụng cho mục đích nghiên cứu, đặc biệt là các nghiên cứu tập trung vào sinh lý bệnh của melanoma, sàng lọc thuốc và phát triển các chiến lược điều trị mới. Dòng tế bào M14 vẫn là một nguồn tài nguyên quan trọng để nâng cao hiểu biết về melanoma và khám phá các phương pháp điều trị mới.

Tissue
Da
Disease
Ung thư hắc tố không có sắc tố
Metastatic site
Mông phải, lớp dưới da
Synonyms
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào giống fibroblast

04Identifiers

Citation
M14 (Số catalog Cytion 302163)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1395

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò đã được khử hoạt tính bằng nhiệt
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
33
Ethnicity
Châu Âu