Přejít na obsah
M14
Tkáň
Kůže
Nemoc
Amelanotický melanom
Místo metastázy
Pravá hýždě, podkoží
Synonyma
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

Dokumenty

M14

Cell line · Číslo výrobku 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie M14 je lidská melanomová buněčná linie odvozená z metastatické kožní léze dospělého pacienta s melanomem. Tato buněčná linie se široce používá ve výzkumu rakoviny, zejména při studiu biologie melanomu, progrese nádoru a hodnocení potenciálních terapeutických látek. Buňky M14 vykazují vlastnosti typické pro maligní melanom, včetně schopnosti vytvářet nádory v imunokompromitovaných myších, což z nich činí cenný nástroj pro studie in vivo i pro experimenty in vitro.

Pokud jde o molekulární vlastnosti, bylo zjištěno, že buňky M14 nesou mutace v genech, které jsou u melanomu často změněny, včetně genu BRAF. Konkrétně buňky M14 nesou mutaci BRAF V600E, která vede ke konstitutivní aktivaci signální dráhy MAPK/ERK a podporuje proliferaci a přežití buněk. Díky tomu jsou buňky M14 důležitým modelem pro studium cílených terapií, jako jsou inhibitory BRAF, které jsou navrženy tak, aby tuto mutaci využívaly. Kromě toho se buňky M14 využívají ve výzkumu imunoterapie díky expresi různých antigenů spojených s melanomem a náchylnosti k modulaci imunitního systému.

Výzkumníci používající buněčnou linii M14 by měli vzít na vědomí, že tyto buňky nejsou vhodné pro terapeutické aplikace a jsou určeny výhradně pro výzkumné účely, zejména pro ty, které se zaměřují na patofyziologii melanomu, screening léčiv a vývoj nových terapeutických strategií. Buněčná linie M14 je i nadále klíčovým zdrojem pro prohloubení našich znalostí o melanomu a zkoumání nových možností léčby.

Tkáň
Kůže
Nemoc
Amelanotický melanom
Místo metastázy
Pravá hýždě, podkoží
Synonyma
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblastům podobné

04Identifikátory

Citace
M14 (katalogové číslo Cytion 302163)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1395

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % tepelně inaktivovaného FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
33
Etnická příslušnost
Evropská