M14

A linha celular M14 é uma linha celular de melanoma humano derivada de uma lesão cutânea metastática de um doente adulto com melanoma. Esta linha celular é amplamente utilizada na investigação do cancro, em particular no estudo da biologia do melanoma, na progressão do tumor e na avaliação de potenciais agentes terapêuticos. As células M14 apresentam caraterísticas típicas do melanoma maligno, incluindo a capacidade de formar tumores em ratinhos imunocomprometidos, o que as torna uma ferramenta valiosa para estudos in vivo, para além de experiências in vitro.

Em termos de caraterísticas moleculares, foi relatado que as células M14 são portadoras de mutações em genes que são frequentemente alterados no melanoma, incluindo o gene BRAF. Especificamente, as células M14 são portadoras da mutação BRAF V600E, que leva à ativação constitutiva da via de sinalização MAPK/ERK, promovendo a proliferação e a sobrevivência das células. Isto faz da M14 um modelo importante para o estudo de terapias direcionadas, como os inibidores BRAF, concebidos para explorar esta mutação. Além disso, as células M14 têm sido utilizadas na investigação da imunoterapia devido à sua expressão de vários antigénios associados ao melanoma e à sua suscetibilidade à modulação do sistema imunitário.

Os investigadores que utilizam a linha celular M14 devem ter em conta que estas células não são adequadas para aplicações terapêuticas e que se destinam exclusivamente a fins de investigação, em especial os que se centram na fisiopatologia do melanoma, no rastreio de medicamentos e no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. A linha celular M14 continua a ser um recurso fundamental para o avanço da nossa compreensão do melanoma e para a exploração de novas vias de tratamento.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia