Siirry sisältöön
M14
Kudos
Iho
Sairaus
Amelanoottinen melanooma
Metastaasikohde
Oikea pakara, hypodermis
Synonyymit
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

Asiakirjat

M14

Cell line · Tuotenumero 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

M14-solulinja on ihmisen melanoomasolulinja, joka on peräisin aikuisen melanoomapotilaan metastaattisesta ihomuutoksesta. Tätä solulinjaa käytetään laajalti syöpätutkimuksessa, erityisesti melanooman biologian, kasvaimen etenemisen ja mahdollisten terapeuttisten aineiden arvioinnissa. M14-soluilla on pahanlaatuiselle melanoomalle tyypillisiä ominaisuuksia, kuten kyky muodostaa kasvaimia immuunipuutteisissa hiirissä, mikä tekee niistä arvokkaan välineen in vivo -tutkimuksiin in vitro -kokeiden lisäksi.

Molekyyliominaisuuksien osalta M14-solujen on raportoitu kantavan mutaatioita geeneissä, jotka muuttuvat usein melanoomassa, mukaan lukien BRAF-geeni. Erityisesti M14-soluissa on BRAF V600E -mutaatio, joka johtaa MAPK/ERK-signalointireitin konstitutiiviseen aktivoitumiseen, mikä edistää solujen lisääntymistä ja selviytymistä. Tämä tekee M14-soluista tärkeän mallin sellaisten kohdennettujen hoitojen, kuten BRAF:n estäjien, tutkimiseen, jotka on suunniteltu hyödyntämään tätä mutaatiota. Lisäksi M14-soluja on hyödynnetty immunoterapiatutkimuksissa, koska ne ilmentävät erilaisia melanoomaan liittyviä antigeenejä ja ovat alttiita immuunijärjestelmän muokkaukselle.

M14-solulinjaa käyttävien tutkijoiden on huomattava, että nämä solut eivät sovellu terapeuttisiin sovelluksiin, vaan ne on tarkoitettu yksinomaan tutkimustarkoituksiin, erityisesti melanooman patofysiologiaan, lääkkeiden seulontaan ja uusien terapeuttisten strategioiden kehittämiseen. M14-solulinja on edelleen keskeinen resurssi, kun pyritään lisäämään ymmärrystä melanoomasta ja tutkimaan uusia hoitokeinoja.

Kudos
Iho
Sairaus
Amelanoottinen melanooma
Metastaasikohde
Oikea pakara, hypodermis
Synonyymit
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset

04Tunnisteet

Lähdeviite
M14 (Cytionin luettelonumero 302163)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1395

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
33
Etnisyys
Eurooppalainen