Skip to content
M14
Tissue
ผิวหนัง
Disease
เมลาโนมาชนิดไม่มีสีเมลานิน
Metastatic site
ก้นขวา, ชั้นใต้ผิวหนัง
Synonyms
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

Documents

M14

Cell line · Product number 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ M14 เป็นสายเซลล์เมลาโนมาของมนุษย์ที่ได้มาจากรอยโรคผิวหนังที่แพร่กระจายของผู้ป่วยผู้ใหญ่ที่เป็นเมลาโนมาสายเซลล์นี้ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการวิจัยมะเร็ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งผิวหนังชนิดเมลาโนมา การพัฒนาของเนื้องอก และการประเมินสารที่มีศักยภาพในการรักษา เซลล์ M14 แสดงลักษณะเฉพาะของมะเร็งผิวหนังชนิดเมลาโนมาที่เป็นมะเร็ง รวมถึงความสามารถในการก่อตัวเป็นเนื้องอกในหนูที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่อง ทำให้เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาในสิ่งมีชีวิต (in vivo) นอกเหนือจากการทดลองในหลอดทดลอง (in vitro)

ในแง่ของคุณลักษณะทางโมเลกุล พบว่าเซลล์ M14 มีการกลายพันธุ์ในยีนที่มักเปลี่ยนแปลงในมะเร็งผิวหนังเมลาโนมา รวมถึงยีน BRAF โดยเฉพาะอย่างยิ่ง เซลล์ M14 มีการกลายพันธุ์ BRAF V600E ซึ่งนำไปสู่การกระตุ้นอย่างต่อเนื่องของเส้นทางสัญญาณ MAPK/ERK ส่งเสริมการเพิ่มจำนวนและการอยู่รอดของเซลล์นี่ทำให้ M14 เป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาการรักษาแบบมุ่งเป้า เช่น ยับยั้ง BRAF ที่ออกแบบมาเพื่อใช้ประโยชน์จากการกลายพันธุ์นี้ นอกจากนี้ เซลล์ M14 ยังถูกนำมาใช้ในการวิจัยภูมิคุ้มกันบำบัดเนื่องจากมีการแสดงออกของแอนติเจนที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งผิวหนังหลายชนิดและมีความไวต่อการปรับเปลี่ยนของระบบภูมิคุ้มกัน

นักวิจัยที่ใช้สายเซลล์ M14 ควรทราบว่าเซลล์เหล่านี้ไม่เหมาะสำหรับการนำไปใช้ในทางการรักษา และมีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในทางวิจัยเท่านั้น โดยเฉพาะอย่างยิ่งในงานวิจัยที่เกี่ยวข้องกับพยาธิสรีรวิทยาของมะเร็งผิวหนัง การคัดกรองยา และการพัฒนา стратегииการรักษาใหม่ ๆ สายเซลล์ M14 ยังคงเป็นทรัพยากรที่สำคัญในการเพิ่มความเข้าใจของเราเกี่ยวกับมะเร็งผิวหนัง และการค้นหาแนวทางใหม่ ๆ ในการรักษา

Tissue
ผิวหนัง
Disease
เมลาโนมาชนิดไม่มีสีเมลานิน
Metastatic site
ก้นขวา, ชั้นใต้ผิวหนัง
Synonyms
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายไฟโบรบลาสต์

04Identifiers

Citation
M14 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 302163)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1395

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS ที่ทำให้ไม่ทำงานทางชีวภาพด้วยความร้อน 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
33
Ethnicity
ยุโรป