M14

La línea celular M14 es una línea celular de melanoma humano derivada de una lesión cutánea metastásica de un paciente adulto con melanoma. Esta línea celular se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer, en particular en el estudio de la biología del melanoma, la progresión tumoral y la evaluación de posibles agentes terapéuticos. Las células M14 presentan características típicas del melanoma maligno, incluida la capacidad de formar tumores en ratones inmunodeprimidos, lo que las convierte en una herramienta valiosa para estudios in vivo, además de para experimentos in vitro.

En cuanto a las características moleculares, se ha descrito que las células M14 portan mutaciones en genes que se alteran con frecuencia en el melanoma, incluido el gen BRAF. En concreto, las células M14 albergan la mutación BRAF V600E, que conduce a la activación constitutiva de la vía de señalización MAPK/ERK, promoviendo la proliferación y la supervivencia celular. Esto convierte a las células M14 en un modelo importante para el estudio de terapias dirigidas, como los inhibidores de BRAF, diseñadas para explotar esta mutación. Además, las células M14 se han utilizado en la investigación sobre inmunoterapia debido a su expresión de varios antígenos asociados al melanoma y a su susceptibilidad a la modulación del sistema inmunitario.

Los investigadores que utilicen la línea celular M14 deben tener en cuenta que estas células no son adecuadas para aplicaciones terapéuticas y que están destinadas únicamente a fines de investigación, en particular los centrados en la fisiopatología del melanoma, el cribado de fármacos y el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas. La línea celular M14 sigue siendo un recurso clave para avanzar en el conocimiento del melanoma y explorar nuevas vías de tratamiento.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía