M14

A linhagem celular M14 é uma linhagem de células de melanoma humano derivada de uma lesão cutânea metastática de um paciente adulto com melanoma. Essa linha celular é amplamente utilizada na pesquisa sobre o câncer, particularmente no estudo da biologia do melanoma, da progressão tumoral e na avaliação de potenciais agentes terapêuticos. As células M14 apresentam características típicas do melanoma maligno, incluindo a capacidade de formar tumores em camundongos imunocomprometidos, o que as torna uma ferramenta valiosa para estudos in vivo, além de experimentos in vitro.

Em termos de características moleculares, foi relatado que as células M14 apresentam mutações em genes frequentemente alterados no melanoma, incluindo o gene BRAF. Especificamente, as células M14 apresentam a mutação BRAF V600E, que leva à ativação constitutiva da via de sinalização MAPK/ERK, promovendo a proliferação e a sobrevivência celular. Isso torna a M14 um importante modelo para o estudo de terapias direcionadas, como os inibidores de BRAF, que são projetadas para explorar essa mutação. Além disso, as células M14 têm sido utilizadas em pesquisas de imunoterapia devido à sua expressão de vários antígenos associados ao melanoma e à sua suscetibilidade à modulação do sistema imunológico.

Pesquisadores que utilizam a linhagem celular M14 devem observar que essas células não são adequadas para aplicações terapêuticas e destinam-se exclusivamente a fins de pesquisa, particularmente aqueles focados na fisiopatologia do melanoma, na triagem de medicamentos e no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. A linhagem celular M14 continua sendo um recurso fundamental para aprofundar nossa compreensão do melanoma e explorar novos caminhos para o tratamento.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.