İçeriğe atla
M14
Doku
Cilt
Hastalık
Amelanotik melanom
Metastaz yeri
Sağ kalça, hipodermis
Eş anlamlılar
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

M14

Cell line · Ürün numarası 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

M14 hücre hattı, melanomlu yetişkin bir hastanın metastatik deri lezyonundan türetilen bir insan melanom hücre hattıdır. Bu hücre hattı kanser araştırmalarında, özellikle melanom biyolojisi, tümör ilerlemesi ve potansiyel terapötik ajanların değerlendirilmesinde yaygın olarak kullanılmaktadır. M14 hücreleri, bağışıklık sistemi baskılanmış farelerde tümör oluşturma yeteneği de dahil olmak üzere malign melanomun tipik özelliklerini sergiler ve bu da onları in vitro deneylere ek olarak in vivo çalışmalar için değerli bir araç haline getirir.

Moleküler özellikler açısından, M14 hücrelerinin BRAF geni de dahil olmak üzere melanomda sıklıkla değiştirilen genlerde mutasyonlar taşıdığı bildirilmiştir. Spesifik olarak, M14 hücreleri, MAPK/ERK sinyal yolunun yapısal aktivasyonuna yol açarak hücre çoğalmasını ve hayatta kalmasını destekleyen BRAF V600E mutasyonunu barındırmaktadır. Bu durum M14'ü, bu mutasyondan yararlanmak üzere tasarlanmış BRAF inhibitörleri gibi hedefe yönelik tedavileri incelemek için önemli bir model haline getirmektedir. Ayrıca, M14 hücreleri çeşitli melanomla ilişkili antijenleri ifade etmeleri ve bağışıklık sistemi modülasyonuna yatkınlıkları nedeniyle immünoterapi araştırmalarında kullanılmıştır.

M14 hücre hattını kullanan araştırmacılar, bu hücrelerin terapötik uygulamalar için uygun olmadığını ve özellikle melanom patofizyolojisi, ilaç taraması ve yeni terapötik stratejilerin geliştirilmesine odaklananlar olmak üzere yalnızca araştırma amaçlı olduğunu unutmamalıdır. M14 hücre hattı, melanom anlayışımızı ilerletmek ve tedavi için yeni yollar keşfetmek için önemli bir kaynak olmaya devam etmektedir.

Doku
Cilt
Hastalık
Amelanotik melanom
Metastaz yeri
Sağ kalça, hipodermis
Eş anlamlılar
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
M14 (Cytion katalog numarası 302163)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1395

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 ısıyla inaktive edilmiş FBS ile destekleyin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
33
Etnik köken
Avrupa