Prejsť na obsah
M14
Tkanivo
Koža
Choroba
Amelanotický melanóm
Miesto metastáz
Pravý zadok, podkožie
Synonymá
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

Dokumenty

M14

Cell line · Číslo výrobku 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia M14 je ľudská melanómová bunková línia odvodená z metastatickej kožnej lézie dospelého pacienta s melanómom. Táto bunková línia sa široko používa vo výskume rakoviny, najmä pri štúdiu biológie melanómu, progresie nádoru a hodnotení potenciálnych terapeutických látok. Bunky M14 vykazujú vlastnosti typické pre malígny melanóm vrátane schopnosti vytvárať nádory v imunokompromitovaných myšiach, čo z nich robí cenný nástroj na štúdie in vivo popri experimentoch in vitro.

Pokiaľ ide o molekulárne vlastnosti, bolo zistené, že bunky M14 nesú mutácie v génoch, ktoré sa často menia pri melanóme, vrátane génu BRAF. Konkrétne bunky M14 obsahujú mutáciu BRAF V600E, ktorá vedie ku konštitutívnej aktivácii signálnej dráhy MAPK/ERK, čím podporuje proliferáciu a prežívanie buniek. To robí z buniek M14 dôležitý model na štúdium cielených terapií, ako sú inhibítory BRAF, ktoré sú navrhnuté tak, aby využívali túto mutáciu. Okrem toho sa bunky M14 využívajú vo výskume imunoterapie vzhľadom na ich expresiu rôznych antigénov súvisiacich s melanómom a náchylnosť na moduláciu imunitného systému.

Výskumníci, ktorí používajú bunkovú líniu M14, by si mali uvedomiť, že tieto bunky nie sú vhodné na terapeutické použitie a sú určené výlučne na výskumné účely, najmä na účely zamerané na patofyziológiu melanómu, skríning liekov a vývoj nových terapeutických stratégií. Bunková línia M14 zostáva kľúčovým zdrojom na zlepšenie nášho chápania melanómu a skúmanie nových možností liečby.

Tkanivo
Koža
Choroba
Amelanotický melanóm
Miesto metastáz
Pravý zadok, podkožie
Synonymá
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblastom podobné

04Identifikátory

Citácia
M14 (katalógové číslo Cytion 302163)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1395

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % tepelne inaktivovaného FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
33
Etnická príslušnosť
Európska