NCM460
Cell line · Référence du produit 305430
The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...
Personnalisation / Recommandations
- NCM460Cell line€800.00
Recommandé (lot le plus récent)
01Informations générales
- Description
La lignée cellulaire NCM460 est dérivée de cellules épithéliales normales de la muqueuse du côlon humain et constitue un modèle in vitro essentiel pour l'étude de la physiologie et de la pathologie intestinales humaines. Cette lignée cellulaire a été établie à partir de tissus histologiquement normaux isolés lors d'une intervention chirurgicale sur un patient atteint d'un cancer de l'estomac, en particulier de la marge transverse du côlon considérée comme exempte de modifications malignes. Les cellules NCM460 présentent des caractéristiques typiques des cellules épithéliales gastro-intestinales, notamment l'expression de marqueurs tels que la villine et le composant sécrétoire humain, ce qui confirme leur origine épithéliale. Il est important de noter que ces cellules conservent un phénotype non tumorigène, comme le démontrent leur incapacité à se développer dans la gélose molle et l'absence de formation de tumeurs chez la souris nude.
La culture des cellules NCM460 nécessite des conditions spécialisées pour soutenir leur croissance en tant que système mixte suspension-monocouche, reflétant différents stades de différenciation épithéliale. La présence de cellules positives à la mucine et l'expression de marqueurs neuroendocriniens dans certaines sous-populations suggèrent une capacité multiligne conservée, indiquant une composante de type souche au sein de la population cellulaire. Cette propriété rend NCM460 particulièrement utile pour les études sur la différenciation cellulaire, le transport de médicaments et les fonctions de barrière épithéliale.
NCM460 a été largement utilisé dans la recherche sur la progression du cancer du côlon, permettant des comparaisons entre les cellules épithéliales normales et malades. Elle sert également de plateforme pour étudier les effets des composants alimentaires, des produits pharmaceutiques et d'autres facteurs externes sur la santé et la maladie de l'épithélium du côlon. Cette lignée cellulaire constitue un outil solide pour faire progresser notre compréhension de la biologie gastro-intestinale aux niveaux cellulaire et moléculaire.
- Tissu
- Colon, muqueuse
- Maladie
- Normal
- Synonymes
- NCM-460
02Classification
- Organisme
- Humain
- Sexe
- Homme
- Propriétés de croissance
- Adepte
- Niveau de biosécurité
- 1
03Caractéristiques
- Morphologie
- De type épithélial
- Type de cellule
- Cellule épithéliale
- Tumorigène
- Non, testé sur des souris nude et des souris athymiques
- Temps de doublement
- 32-38 heures
04Identifiants
- Référence
- NCM460 (numéro de catalogue Cytion 305430)
- Numéro d'identification fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0460
05Manipulation et culture
- Milieu de culture
- DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
- Atmosphère d'incubation
37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.
- Compléments alimentaires
- Compléter le milieu avec 10 % de FBS et 1 % de NEAA.
- Réactif de dissociation
- Accutase
- Repiquage
- Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Décongélation et mise en culture
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Contrôle qualité et cryoconservation
- Stérilité
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.
Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.
- Milieu de congélation
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
- Conditions de stockage
Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.
- Conditions de livraison
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
07Donateur
- Âge du donneur
- 68 ans
- Origine ethnique
- Hispanique
08Aspects juridiques et sécurité
- Consignes de sécurité
- Lorsque l'on envisage de stocker un cryovial dans l'azote liquide en vue d'une décongélation ultérieure, il est obligatoire de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Des gants et des vêtements de protection appropriés sont indispensables, et l'utilisation d'un masque facial ou de lunettes de sécurité est requise pendant le transfert des échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d'azote liquide. Ceci afin de réduire le risque de blessures dues à l'explosion potentielle des cryoviaux lors de leur retrait, qui peut entraîner la projection de fragments tranchants.
- Garantie
Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit
Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie
- Un accord de transfert de matériel est requis
- Oui
