NCM460

A linhagem celular NCM460 é derivada de células epiteliais normais da mucosa do cólon humano, constituindo um modelo in vitro essencial para o estudo da fisiologia e da patologia intestinal humana. Essa linhagem celular foi estabelecida a partir de tecido histologicamente normal isolado durante uma cirurgia em um paciente com câncer gástrico, especificamente da margem do cólon transverso considerada livre de alterações malignas. As células NCM460 apresentam características típicas das células epiteliais gastrointestinais, incluindo a expressão de marcadores como a vilina e o componente secretório humano, confirmando sua origem epitelial. É importante ressaltar que essas células mantêm um fenótipo não tumorigênico, conforme demonstrado por sua incapacidade de crescer em ágar mole e pela ausência de formação de tumores em camundongos nude.

A cultura das células NCM460 requer condições especializadas para sustentar seu crescimento como um sistema misto de suspensão e monocamada, refletindo diferentes estágios de diferenciação epitelial. A presença de células positivas para mucina e a expressão de marcadores neuroendócrinos em algumas subpopulações sugerem uma capacidade multilinhal preservada, indicativa de um componente semelhante a células-tronco dentro da população celular. Essa propriedade torna as células NCM460 particularmente úteis para estudos sobre diferenciação celular, transporte de fármacos e funções da barreira epitelial.

A NCM460 tem sido amplamente utilizada em pesquisas com foco na progressão do câncer de cólon, permitindo comparações entre células epiteliais normais e doentes. Ela também serve como plataforma para investigar os efeitos de componentes alimentares, medicamentos e outros fatores externos na saúde e nas doenças do epitélio do cólon. Essa linhagem celular oferece uma ferramenta robusta para aprofundar nossa compreensão da biologia gastrointestinal nos níveis celular e molecular.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.