NCM460
Cell line · Številka izdelka 305430
The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...
Prilagajanje / Priporočila
- NCM460Cell line€800.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
Celična linija NCM460 izhaja iz normalnih epitelijskih celic sluznice debelega črevesa in predstavlja pomemben in vitro model za preučevanje fiziologije in patologije človeškega črevesja. Ta celična linija je bila ustvarjena iz histološko normalnega tkiva, izoliranega med operacijo bolnika z rakom želodca, zlasti iz prečnega roba debelega črevesa, ki je veljal za prostega malignih sprememb. Celice NCM460 imajo značilnosti, značilne za epitelijske celice prebavil, vključno z izražanjem označevalcev, kot sta villin in človeška sekretorna komponenta, kar potrjuje njihov epitelijski izvor. Pomembno je, da te celice ohranjajo netumorigen fenotip, kar dokazujeta njihova nezmožnost rasti v mehkem agarju in odsotnost tvorbe tumorjev pri golih miših.
Za gojenje celic NCM460 so potrebni posebni pogoji, ki podpirajo njihovo rast v obliki mešane suspenzije in monoslojnega sistema, ki odraža različne stopnje diferenciacije epitela. Prisotnost mucin pozitivnih celic in izražanje nevroendokrinih označevalcev v nekaterih subpopulacijah kaže na ohranjeno večstopenjsko sposobnost, kar kaže na matično komponento v populaciji celic. Zaradi te lastnosti je NCM460 še posebej uporaben za študije diferenciacije celic, prenosa zdravil in epitelijskih pregradnih funkcij.
NCM460 se pogosto uporablja v raziskavah, ki se osredotočajo na napredovanje raka debelega črevesa, saj omogoča primerjave med normalnimi in bolnimi epitelijskimi celicami. Uporablja se tudi kot platforma za raziskovanje učinkov prehranskih sestavin, farmacevtskih izdelkov in drugih zunanjih dejavnikov na zdravje in bolezen epitelija debelega črevesa. Ta celična linija je zanesljivo orodje za boljše razumevanje biologije prebavil na celični in molekularni ravni.
- Tkivo
- Debelo črevo, sluznica
- Bolezen
- Normalno
- Sinonimi
- NCM-460
02Razvrstitev
- Organizem
- Človek
- Seks
- Moški
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelijam podobni
- Vrsta celice
- Epitelijska celica
- Tumorigeničen
- Ne, testirano na golih miših in athimskih miših
- Čas podvojitve
- 32-38 ur
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- NCM460 (kataloška številka Cytion 305430)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0460
05Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Dopolnite medij z 10 % FBS in 1 % NEAA.
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
07Donator
- Starost darovalca
- 68 let
- Etnična pripadnost
- Hispanika
08Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da
