Preskoči na vsebino
NCM460
Tkivo
Debelo črevo, sluznica
Bolezen
Normalno
Sinonimi
NCM-460

Dokumenti

NCM460

Cell line · Številka izdelka 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija NCM460 izhaja iz normalnih epitelijskih celic sluznice debelega črevesa in predstavlja pomemben in vitro model za preučevanje fiziologije in patologije človeškega črevesja. Ta celična linija je bila ustvarjena iz histološko normalnega tkiva, izoliranega med operacijo bolnika z rakom želodca, zlasti iz prečnega roba debelega črevesa, ki je veljal za prostega malignih sprememb. Celice NCM460 imajo značilnosti, značilne za epitelijske celice prebavil, vključno z izražanjem označevalcev, kot sta villin in človeška sekretorna komponenta, kar potrjuje njihov epitelijski izvor. Pomembno je, da te celice ohranjajo netumorigen fenotip, kar dokazujeta njihova nezmožnost rasti v mehkem agarju in odsotnost tvorbe tumorjev pri golih miših.

Za gojenje celic NCM460 so potrebni posebni pogoji, ki podpirajo njihovo rast v obliki mešane suspenzije in monoslojnega sistema, ki odraža različne stopnje diferenciacije epitela. Prisotnost mucin pozitivnih celic in izražanje nevroendokrinih označevalcev v nekaterih subpopulacijah kaže na ohranjeno večstopenjsko sposobnost, kar kaže na matično komponento v populaciji celic. Zaradi te lastnosti je NCM460 še posebej uporaben za študije diferenciacije celic, prenosa zdravil in epitelijskih pregradnih funkcij.

NCM460 se pogosto uporablja v raziskavah, ki se osredotočajo na napredovanje raka debelega črevesa, saj omogoča primerjave med normalnimi in bolnimi epitelijskimi celicami. Uporablja se tudi kot platforma za raziskovanje učinkov prehranskih sestavin, farmacevtskih izdelkov in drugih zunanjih dejavnikov na zdravje in bolezen epitelija debelega črevesa. Ta celična linija je zanesljivo orodje za boljše razumevanje biologije prebavil na celični in molekularni ravni.

Tkivo
Debelo črevo, sluznica
Bolezen
Normalno
Sinonimi
  • NCM-460

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Epitelijska celica
Tumorigeničen
Ne, testirano na golih miših in athimskih miših
Čas podvojitve
32-38 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
NCM460 (kataloška številka Cytion 305430)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0460

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Dopolnite medij z 10 % FBS in 1 % NEAA.
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
68 let
Etnična pripadnost
Hispanika