NCM460

La lignée cellulaire NCM460 est dérivée de cellules épithéliales normales de la muqueuse du côlon humain; elle constitue un modèle in vitro essentiel pour l’étude de la physiologie et de la pathologie intestinales humaines. Cette lignée cellulaire a été établie à partir d’un tissu histologiquement normal prélevé lors d’une intervention chirurgicale chez un patient atteint d’un cancer de l’estomac, plus précisément au niveau du bord du côlon transverse considéré comme exempt de modifications malignes. Les cellules NCM460 présentent les caractéristiques typiques des cellules épithéliales gastro-intestinales, notamment l’expression de marqueurs tels que la villine et le composant sécrétoire humain, ce qui confirme leur origine épithéliale. Il est important de noter que ces cellules conservent un phénotype non tumorigène, comme le démontrent leur incapacité à se développer dans de l’agar mou et l’absence de formation de tumeurs chez les souris nues.

La culture des cellules NCM460 nécessite des conditions spécialisées pour soutenir leur croissance sous la forme d’un système mixte de suspension et de monocouche, reflétant les différents stades de la différenciation épithéliale. La présence de cellules positives à la mucine et l’expression de marqueurs neuroendocriniens dans certaines sous-populations suggèrent une capacité multilignée préservée, indiquant l’existence d’une composante de type souche au sein de la population cellulaire. Cette propriété rend la lignée NCM460 particulièrement utile pour les études sur la différenciation cellulaire, le transport des médicaments et les fonctions de barrière épithéliale.

La lignée NCM460 a été largement utilisée dans la recherche axée sur la progression du cancer du côlon, permettant des comparaisons entre les cellules épithéliales normales et malades. Elle sert également de plateforme pour étudier les effets des composants alimentaires, des produits pharmaceutiques et d’autres facteurs externes sur la santé et les pathologies de l’épithélium du côlon. Cette lignée cellulaire constitue un outil robuste permettant d’approfondir notre compréhension de la biologie gastro-intestinale aux niveaux cellulaire et moléculaire.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.