Prejsť na obsah
NCM460
Tkanivo
Hrubé črevo, sliznica
Choroba
Normálne
Synonymá
NCM-460

Dokumenty

NCM460

Cell line · Číslo výrobku 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia NCM460 je odvodená z normálnych epitelových buniek ľudskej sliznice hrubého čreva a predstavuje dôležitý in vitro model na štúdium fyziológie a patológie ľudského čreva. Táto bunková línia bola vytvorená z histologicky normálneho tkaniva izolovaného počas operácie pacienta s rakovinou žalúdka, konkrétne z priečneho okraja hrubého čreva považovaného za bez malígnych zmien. Bunky NCM460 vykazujú vlastnosti typické pre epitelové bunky tráviaceho traktu vrátane expresie markerov, ako je vilín a ľudská sekrečná zložka, čo potvrdzuje ich epitelový pôvod. Dôležité je, že tieto bunky si zachovávajú nenádorový fenotyp, čo dokazuje ich neschopnosť rásť v mäkkom agare a absencia tvorby nádorov u nahých myší.

Kultivácia buniek NCM460 si vyžaduje špecializované podmienky na podporu ich rastu ako zmiešaného systému suspenznej monovrstvy, ktorý odráža rôzne štádiá epitelovej diferenciácie. Prítomnosť mucín-pozitívnych buniek a expresia neuroendokrinných markerov v niektorých subpopuláciách naznačuje zachovanú multilineárnu schopnosť, čo naznačuje kmeňovú zložku v bunkovej populácii. Vďaka tejto vlastnosti je NCM460 obzvlášť užitočný na štúdie diferenciácie buniek, transportu liečiv a bariérových funkcií epitelu.

NCM460 sa široko uplatňuje vo výskume zameranom na progresiu rakoviny hrubého čreva, čo umožňuje porovnanie normálnych a chorých epitelových buniek. Slúži tiež ako platforma na skúmanie účinkov zložiek stravy, liekov a iných vonkajších faktorov na zdravie a ochorenie epitelu hrubého čreva. Táto bunková línia ponúka spoľahlivý nástroj na zlepšenie nášho chápania gastrointestinálnej biológie na bunkovej a molekulárnej úrovni.

Tkanivo
Hrubé črevo, sliznica
Choroba
Normálne
Synonymá
  • NCM-460

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Epitelová bunka
Tumorigenický
Nie, testované na nahých myšiach a atýmových myšiach
Doba zdvojnásobenia
32-38 hodín

04Identifikátory

Citácia
NCM460 (katalógové číslo Cytion 305430)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0460

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium 10 % FBS a 1 % NEAA.
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
68 rokov
Etnická príslušnosť
Hispánska