NCM460
Cell line · Tuotenumero 305430
The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...
Räätälöinti / Suositukset
- NCM460Cell line€800.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
NCM460-solulinja on peräisin ihmisen normaalista paksusuolen limakalvon epiteelisoluista, ja se tarjoaa kriittisen in vitro -mallin ihmisen suoliston fysiologian ja patologian tutkimiseen. Tämä solulinja perustettiin histologisesti normaalista kudoksesta, joka eristettiin mahasyöpäpotilaan leikkauksen aikana, erityisesti paksusuolen poikkileikkauksen marginaalista, jota pidettiin vapaana pahanlaatuisista muutoksista. NCM460-soluilla on ruoansulatuskanavan epiteelisoluille tyypillisiä ominaisuuksia, kuten villinin ja ihmisen erittävän komponentin kaltaisten merkkiaineiden ilmentyminen, mikä vahvistaa niiden epiteeliperäisyyden. Tärkeää on, että nämä solut säilyttävät kasvaimia aiheuttamattoman fenotyypin, kuten niiden kyvyttömyys kasvaa pehmeässä agarissa ja kasvainten muodostumisen puuttuminen alastomilla hiirillä osoittaa.
NCM460-solujen viljely vaatii erikoistuneita olosuhteita, jotta niiden kasvua voidaan tukea sekasuspensio-monokerros-järjestelmänä, joka heijastaa epiteelin erilaistumisen eri vaiheita. Mysiinipositiivisten solujen esiintyminen ja neuroendokriinisten merkkiaineiden ilmentyminen joissakin osapopulaatioissa viittaa siihen, että solupopulaatiossa on säilynyt monilinjainen kyky, mikä viittaa kantasolujen kaltaiseen komponenttiin. Tämä ominaisuus tekee NCM460:stä erityisen hyödyllisen solujen erilaistumista, lääkekuljetusta ja epiteelin esteen toimintaa koskevissa tutkimuksissa.
NCM460:tä on sovellettu laajalti paksusuolen syövän etenemiseen keskittyvässä tutkimuksessa, mikä mahdollistaa normaalien ja sairaiden epiteelisolujen vertailun. Se toimii myös alustana, jolla tutkitaan ravinnon komponenttien, lääkkeiden ja muiden ulkoisten tekijöiden vaikutuksia paksusuolen epiteelin terveyteen ja sairauteen. Tämä solulinja tarjoaa vankan välineen, jonka avulla voidaan lisätä ymmärrystä ruoansulatuskanavan biologiasta solu- ja molekyylitasolla.
- Kudos
- Paksusuoli, limakalvo
- Sairaus
- Normaali
- Synonyymit
- NCM-460
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
- Solutyyppi
- Epiteelisolu
- Kasvaimia aiheuttava
- Ei, testattu alastomilla hiirillä ja athymic-hiirillä
- Kaksinkertaistumisaika
- 32-38 tuntia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- NCM460 (Cytionin luettelonumero 305430)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0460
05Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Lisää väliaineeseen 10 % FBS ja 1 % NEAA.
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
07Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 68 vuotta
- Etnisyys
- Hispanic
08Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
