Gå til innholdet
NCM460
Vev
Tykktarm, slimhinne
Sykdom
Normal
Synonymer
NCM-460

Dokumenter

NCM460

Cell line · Produktnummer 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

NCM460-cellelinjen er avledet fra normale humane tykktarmsslimhinneepitelceller, og er en viktig in vitro-modell for studier av tarmfysiologi og -patologi hos mennesker. Denne cellelinjen ble etablert fra histologisk normalt vev som ble isolert under operasjonen av en magekreftpasient, nærmere bestemt fra den tverrgående tykktarmsmarginen som ble ansett som fri for ondartede forandringer. NCM460-celler har egenskaper som er typiske for gastrointestinale epitelceller, inkludert uttrykk av markører som villin og human sekretorisk komponent, noe som bekrefter deres epiteliale opprinnelse. Det er viktig å merke seg at disse cellene opprettholder en ikke-tumorogen fenotype, noe som demonstreres ved at de ikke kan vokse i myk agar og ikke danner svulster i nakne mus.

Dyrking av NCM460-celler krever spesialiserte forhold for å støtte veksten som et blandet suspensjons-monolagsystem, noe som gjenspeiler ulike stadier av epitelial differensiering. Tilstedeværelsen av mucin-positive celler og uttrykk for nevroendokrine markører i enkelte subpopulasjoner tyder på at cellene har beholdt evnen til å utvikle seg i flere stadier, noe som indikerer en stamcellelignende komponent i cellepopulasjonen. Denne egenskapen gjør NCM460 spesielt nyttig for studier av celledifferensiering, medikamenttransport og epiteliale barrierefunksjoner.

NCM460 har blitt mye brukt i forskning med fokus på progresjon av tykktarmskreft, noe som muliggjør sammenligninger mellom normale og syke epitelceller. Den fungerer også som en plattform for å undersøke effekten av kostholdskomponenter, legemidler og andre eksterne faktorer på tykktarmsepitelets helse og sykdom. Denne cellelinjen er et robust verktøy for å øke vår forståelse av gastrointestinal biologi på cellulært og molekylært nivå.

Vev
Tykktarm, slimhinne
Sykdom
Normal
Synonymer
  • NCM-460

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelcelle
Tumorinduserende
Nei, testet i nakenmus og athymiske mus
Fordoblingstid
32-38 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCM460 (Cytion-katalognummer 305430)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0460

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Tilsett 10 % FBS og 1 % NEAA til mediet.
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
68 år
Etnisitet
Latinamerikansk