Премини към съдържанието
NCM460
Тъкан
Дебело черво, лигавица
Заболяване
Нормален
Синоними
NCM-460

Документи

NCM460

Cell line · Номер на продукта 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия NCM460 е получена от нормални епителни клетки на лигавицата на дебелото черво и представлява важен in vitro модел за изучаване на физиологията и патологията на червата. Тази клетъчна линия е създадена от хистологично нормална тъкан, изолирана по време на операция от пациент с рак на стомаха, по-конкретно от напречния ръб на дебелото черво, считан за свободен от злокачествени промени. Клетките NCM460 притежават характеристики, типични за епителните клетки на стомашно-чревния тракт, включително експресия на маркери като вилин и човешки секреторен компонент, което потвърждава техния епителен произход. Важно е да се отбележи, че тези клетки поддържат нетуморен фенотип, което се доказва от неспособността им да растат в мек агар и липсата на туморно образуване при голи мишки.

Култивирането на NCM460 клетки изисква специализирани условия за поддържане на растежа им като смесена система от суспензия и монослой, отразяваща различни етапи на епителна диференциация. Наличието на муцин-положителни клетки и експресия на невроендокринни маркери в някои субпопулации предполага запазена способност за многолинейност, което е показателно за стволоподобен компонент в клетъчната популация. Това свойство прави NCM460 особено полезен за изследвания на клетъчната диференциация, преноса на лекарства и функциите на епителната бариера.

NCM460 се прилага широко в изследвания, насочени към прогресията на рака на дебелото черво, като позволява сравнение между нормални и болни епителни клетки. Той също така служи като платформа за изследване на въздействието на диетични компоненти, фармацевтични продукти и други външни фактори върху здравето и заболяванията на епителия на дебелото черво. Тази клетъчна линия предлага надежден инструмент за подобряване на разбирането ни за стомашно-чревната биология на клетъчно и молекулярно ниво.

Тъкан
Дебело черво, лигавица
Заболяване
Нормален
Синоними
  • NCM-460

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителна клетка
Туморогенен
Не, тествано при голи мишки и атимни мишки
Време за удвояване
32-38 часа

04Идентификатори

Източник
NCM460 (каталожен номер 305430 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0460

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Добавете към средата 10% FBS и 1% NEAA.
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
68 години
Етническа принадлежност
Испанците