Gå direkt till innehållet
NCM460
Vävnad
Kolon, slemhinna
Sjukdom
Normal
Synonymer
NCM-460

NCM460

Cell line · Produktnummer 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen NCM460 härrör från normala epitelceller från slemhinnan i tjocktarmen hos människa och utgör en viktig in vitro-modell för studier av tarmfysiologi och tarmpatologi hos människa. Denna cellinje etablerades från histologiskt normal vävnad som isolerats under operation från en patient med magcancer, specifikt från den tvärgående tjocktarmsmarginalen som ansågs fri från maligna förändringar. NCM460-cellerna uppvisar egenskaper som är typiska för gastrointestinala epitelceller, inklusive uttryck av markörer som villin och human sekretorisk komponent, vilket bekräftar deras epiteliala ursprung. Det är viktigt att dessa celler bibehåller en icke-tumorogen fenotyp, vilket framgår av deras oförmåga att växa i mjuk agar och avsaknad av tumörbildning i nakna möss.

Odlingen av NCM460-celler kräver specialiserade förhållanden för att stödja deras tillväxt som ett system med blandade suspensioner och monolager, vilket återspeglar olika stadier av epitelial differentiering. Förekomsten av mucinpositiva celler och uttryck för neuroendokrina markörer i vissa subpopulationer tyder på en bibehållen multilinjeförmåga, vilket indikerar en stamliknande komponent inom cellpopulationen. Denna egenskap gör NCM460 särskilt användbar för studier av celldifferentiering, läkemedelstransport och epiteliala barriärfunktioner.

NCM460 har använts i stor utsträckning inom forskning som fokuserar på utveckling av tjocktarmscancer, vilket möjliggör jämförelser mellan normala och sjuka epitelceller. Den fungerar också som en plattform för att undersöka effekterna av kostkomponenter, läkemedel och andra externa faktorer på tjocktarmsepitelets hälsa och sjukdom. Denna cellinje erbjuder ett robust verktyg för att öka vår förståelse av gastrointestinal biologi på cellulär och molekylär nivå.

Vävnad
Kolon, slemhinna
Sjukdom
Normal
Synonymer
  • NCM-460

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Celltyp
Epitelial cell
Tumörframkallande
Nej, testad på nakenmöss och athymiska möss
Fördubblingstid
32-38 timmar

04Identifierare

Källa
NCM460 (Cytion katalognummer 305430)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0460

05Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Tillsätt 10 % FBS och 1 % NEAA till mediet.
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
68 år
Etnicitet
Latinamerikansk