الانتقال إلى المحتوى
NCM460
الأنسجة
القولون، الغشاء المخاطي
المرض
عادي
المرادفات
NCM-460

المستندات

NCM460

Cell line · رقم المنتج 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يُشتق الخط الخلوي NCM460 من الخلايا الظهارية المخاطية الطبيعية للقولون البشري، مما يوفر نموذجاً مختبرياً بالغ الأهمية لدراسة فسيولوجيا الأمعاء البشرية وعلم الأمراض. تم إنشاء هذا الخط الخلوي من نسيج طبيعي من الناحية النسيجية تم عزله أثناء الجراحة من مريض بسرطان المعدة، وتحديداً من هامش القولون المستعرض الذي يعتبر خالياً من التغيرات الخبيثة. تُظهر خلايا NCM460 خصائص نموذجية للخلايا الظهارية المعوية، بما في ذلك التعبير عن علامات مثل الفلين والمكون الإفرازي البشري، مما يؤكد أصلها الظهاري. والأهم من ذلك أن هذه الخلايا تحافظ على نمط ظاهري غير ورمي كما يتضح من عدم قدرتها على النمو في أجار لين وعدم تكوّن الورم في الفئران العارية.

تتطلب مزرعة خلايا NCM460 ظروفًا متخصصة لدعم نموها كنظام طبقة معلقة أحادية مختلطة، مما يعكس مراحل متفاوتة من التمايز الظهاري. يشير وجود خلايا موجبة للميوسين وتعبير علامات الغدد الصماء العصبية في بعض المجموعات السكانية الفرعية إلى وجود قدرة محتفظة متعددة الأطوار، مما يدل على وجود مكون شبيه بالجذع داخل مجموعة الخلايا. هذه الخاصية تجعل NCM460 مفيدًا بشكل خاص للدراسات حول تمايز الخلايا ونقل الأدوية ووظائف الحاجز الظهاري.

وقد تم تطبيق NCM460 على نطاق واسع في الأبحاث التي تركز على تطور سرطان القولون، مما يسمح بإجراء مقارنات بين الخلايا الظهارية الطبيعية والمريضة. كما أنه يُستخدم كمنصة لدراسة تأثيرات المكونات الغذائية والأدوية والعوامل الخارجية الأخرى على صحة القولون الظهارية ومرضه. يوفر هذا الخط الخلوي أداة قوية لتطوير فهمنا لبيولوجيا الجهاز الهضمي على المستويين الخلوي والجزيئي.

الأنسجة
القولون، الغشاء المخاطي
المرض
عادي
المرادفات
  • NCM-460

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
نوع الخلية
الخلية الظهارية
مُسبِّب للأورام
لا، تم اختباره على فئران عارية وفئران عديمات الجنس
زمن المضاعفة
32-38 ساعة

04المعرّفات

المرجع
NCM460 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305430)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0460

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
أضف إلى الوسط 10٪ FBS و 1٪ NEAA
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
68 سنة
الأصل العرقي
من أصل إسباني