NCM460
Cell line · Toote number 305430
The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...
Kohandamine / Soovitused
- NCM460Cell line€800.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
NCM460 rakuliin on saadud inimese normaalsetest käärsoole limaskesta epiteelirakkudest, mis on oluline in vitro mudel inimese soolestiku füsioloogia ja patoloogia uurimiseks. See rakuliin loodi histoloogiliselt normaalsest koest, mis isoleeriti maovähiga patsiendi operatsiooni käigus, täpsemalt pahaolulistest muutustest vabaks peetavast põikikoolo servast. NCM460 rakkudel on seedetrakti epiteelirakkudele iseloomulikud omadused, sealhulgas selliste markerite nagu villiin ja inimese sekretoorne komponent ekspressioon, mis kinnitab nende epiteelialast päritolu. Oluline on see, et need rakud säilitavad mittetuumoriseeriva fenotüübi, mida näitab nende võimetus kasvada pehmel agaril ja kasvajate moodustumise puudumine alasti hiirtel.
NCM460 rakkude kasvatamiseks on vaja spetsiaalseid tingimusi, et toetada nende kasvu segasuspensiooni ja monokihi süsteemina, mis peegeldab epiteeli diferentseerumise erinevaid staadiume. Mütsiinipositiivsete rakkude olemasolu ja neuroendokriinsete markerite ekspressioon mõnes alampopulatsioonis viitab säilitatud multiliineerimisvõimele, mis viitab tüvelise komponendi olemasolule rakupopulatsioonis. See omadus muudab NCM460 eriti kasulikuks rakkude diferentseerumise, ravimitranspordi ja epiteeli barjääri funktsioonide uurimisel.
NCM460 on laialdaselt rakendatud uuringutes, mis keskenduvad käärsoolevähi progresseerumisele, võimaldades võrdlusi normaalsete ja haigete epiteelirakkude vahel. Samuti on see platvormiks, mille abil saab uurida toitumiskomponentide, ravimite ja muude väliste tegurite mõju jämesoole epiteeli tervisele ja haigustele. See rakuliin pakub tugevat vahendit seedetrakti bioloogia mõistmise edendamiseks raku- ja molekulaarsel tasandil.
- Kude
- Jämesool, limaskest
- Haigus
- Tavaline
- Sünonüümid
- NCM-460
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Mees
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Rakutüüp
- Epiteelirakk
- Tuumorigeenne
- Ei, testitud alasti hiirtel ja atüümsetel hiirtel
- Kahekordistumisaeg
- 32-38 tundi
04Tunnused
- Viide
- NCM460 (Cytioni katalooginumber 305430)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0460
05Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendage keskkonda 10% FBS-i ja 1% NEAA-ga.
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
07Annetaja
- Doonori vanus
- 68 aastat
- Etniline kuuluvus
- Hispaanlased
08Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah
