Skip to content
NCM460
Tissue
ลำไส้ใหญ่, เยื่อบุ
Disease
ปกติ
Synonyms
NCM-460

Documents

NCM460

Cell line · Product number 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ NCM460 มีต้นกำเนิดจากเซลล์เยื่อบุผิวลำไส้ใหญ่ปกติของมนุษย์ ซึ่งให้แบบจำลองในหลอดทดลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาสรีรวิทยาและพยาธิสภาพของลำไส้ในมนุษย์ สายเซลล์นี้ถูกสร้างขึ้นจากเนื้อเยื่อปกติทางจุลพยาธิวิทยาที่แยกได้ระหว่างการผ่าตัดจากผู้ป่วยโรคมะเร็งกระเพาะอาหาร โดยเฉพาะจากขอบลำไส้ใหญ่ส่วนขวางที่ถือว่าปราศจากการเปลี่ยนแปลงที่เป็นมะเร็งเซลล์ NCM460 แสดงลักษณะเฉพาะของเซลล์เยื่อบุผิวทางเดินอาหาร รวมถึงการแสดงออกของตัวบ่งชี้เช่น วิลลิน และองค์ประกอบในการหลั่งของมนุษย์ ซึ่งยืนยันถึงต้นกำเนิดจากเยื่อบุผิวของเซลล์เหล่านี้ ที่สำคัญ เซลล์เหล่านี้ยังคงรักษาฟีโนไทป์ที่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก ซึ่งแสดงให้เห็นจากการที่ไม่สามารถเจริญเติบโตในวุ้นอ่อนและไม่สามารถก่อตัวเป็นเนื้องอกในหนูที่ไม่มีขน

การเพาะเลี้ยงเซลล์ NCM460 ต้องการสภาวะเฉพาะเพื่อสนับสนุนการเจริญเติบโตในรูปแบบของระบบแขวนลอยผสมกับชั้นเดียว ซึ่งสะท้อนถึงระยะต่างๆ ของการแยกแยะเซลล์เยื่อบุผิว การมีอยู่ของเซลล์ที่มีมิวซินบวกและการแสดงออกของเครื่องหมายเนื้องอกต่อมไร้ท่อในบางประชากรย่อยบ่งชี้ถึงความสามารถในการแยกแยะหลายสายพันธุ์ที่ยังคงอยู่ ซึ่งแสดงถึงองค์ประกอบคล้ายเซลล์ต้นกำเนิดภายในประชากรเซลล์ คุณสมบัตินี้ทำให้ NCM460 มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับการแยกแยะเซลล์ การขนส่งยา และการทำงานของเยื่อบุผิว

NCM460 ได้รับการนำไปใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยที่มุ่งเน้นการเจริญเติบโตของมะเร็งลำไส้ใหญ่ โดยสามารถเปรียบเทียบเซลล์เยื่อบุผิวปกติกับเซลล์ที่ผิดปกติได้ นอกจากนี้ยังเป็นแพลตฟอร์มสำหรับการศึกษาผลกระทบของส่วนประกอบในอาหาร ยา และปัจจัยภายนอกอื่น ๆ ต่อสุขภาพของเยื่อบุผิวลำไส้ใหญ่และโรคต่าง ๆ สายเซลล์นี้มอบเครื่องมือที่แข็งแกร่งสำหรับการพัฒนาความเข้าใจของเราเกี่ยวกับชีววิทยาของระบบทางเดินอาหารในระดับเซลล์และโมเลกุล

Tissue
ลำไส้ใหญ่, เยื่อบุ
Disease
ปกติ
Synonyms
  • NCM-460

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิว
Tumourigenic
ไม่, ทดสอบในหนูที่ไม่มีขนและหนูที่ไม่มีต่อมไทมัส
Doubling time
32-38 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
NCM460 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305430)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0460

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารเสริมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
68 ปี
Ethnicity
ฮิสแปนิก