NCM460
Cell line · Product number 305430
The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים NCM460 נגזר מתאי אפיתל רירית המעי הגס האנושיים הנורמליים, ומספק מודל קריטי במבחנה לחקר הפיזיולוגיה והפתולוגיה של המעי האנושי. קו תאים זה הוקם מרקמה היסטולוגית נורמלית שהוצאה במהלך ניתוח מחולה בסרטן הקיבה, ובאופן ספציפי משולי המעי הגס הרוחבי שנחשב נקי משינויים ממאירים. תאי NCM460 מציגים מאפיינים אופייניים לתאי אפיתל במערכת העיכול, כולל ביטוי של סמנים כגון וילין ורכיב הפרשה אנושי, המאשרים את מקורם האפיתלי. חשוב לציין שתאים אלה שומרים על פנוטיפ לא-ממאיר, כפי שמודגם על ידי חוסר יכולתם לגדול באגר רך והיעדר היווצרות גידולים בעכברים עירומים.
התרבות של תאי NCM460 דורשת תנאים מיוחדים כדי לתמוך בצמיחתם כמערכת מעורבת של תמיסה-שכבה אחת, המשקפת שלבים שונים של התמיינות אפיתלית. נוכחותם של תאים חיוביים למוצין וביטוי סמן נוירואנדוקריני בחלק מהתת-אוכלוסיות מצביעה על יכולת רב-קווית משומרת, המעידה על מרכיב דמוי גזע בתוך אוכלוסיית התאים. תכונה זו הופכת את NCM460 לשימושי במיוחד למחקרים על התמיינות תאים, הובלת תרופות ותפקודי מחסום אפיתלי.
NCM460 נמצא בשימוש נרחב במחקרים המתמקדים בהתקדמות סרטן המעי הגס, ומאפשר השוואה בין תאים אפיתל נורמליים לחולים. הוא משמש גם כפלטפורמה לחקר ההשפעות של מרכיבי תזונה, תרופות וגורמים חיצוניים אחרים על בריאות ומחלות אפיתל המעי הגס. קו תאים זה מהווה כלי יעיל לקידום ההבנה שלנו של הביולוגיה של מערכת העיכול ברמה התאית והמולקולרית.
- Tissue
- מעי גס, רירית
- Disease
- רגיל
- Synonyms
- NCM-460
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Cell type
- תא אפיתל
- Tumourigenic
- לא, נבדק בעכברים עירומים ובעכברים אטומיים
- Doubling time
- 32-38 שעות
04Identifiers
- Citation
- NCM460 (מספר קטלוגי Cytion 305430)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0460
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS ו-1% NEAA.
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Donor age
- 68 שנים
- Ethnicity
- היספני
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
