Skip to content
NCM460
Tissue
מעי גס, רירית
Disease
רגיל
Synonyms
NCM-460

Documents

NCM460

Cell line · Product number 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים NCM460 נגזר מתאי אפיתל רירית המעי הגס האנושיים הנורמליים, ומספק מודל קריטי במבחנה לחקר הפיזיולוגיה והפתולוגיה של המעי האנושי. קו תאים זה הוקם מרקמה היסטולוגית נורמלית שהוצאה במהלך ניתוח מחולה בסרטן הקיבה, ובאופן ספציפי משולי המעי הגס הרוחבי שנחשב נקי משינויים ממאירים. תאי NCM460 מציגים מאפיינים אופייניים לתאי אפיתל במערכת העיכול, כולל ביטוי של סמנים כגון וילין ורכיב הפרשה אנושי, המאשרים את מקורם האפיתלי. חשוב לציין שתאים אלה שומרים על פנוטיפ לא-ממאיר, כפי שמודגם על ידי חוסר יכולתם לגדול באגר רך והיעדר היווצרות גידולים בעכברים עירומים.

התרבות של תאי NCM460 דורשת תנאים מיוחדים כדי לתמוך בצמיחתם כמערכת מעורבת של תמיסה-שכבה אחת, המשקפת שלבים שונים של התמיינות אפיתלית. נוכחותם של תאים חיוביים למוצין וביטוי סמן נוירואנדוקריני בחלק מהתת-אוכלוסיות מצביעה על יכולת רב-קווית משומרת, המעידה על מרכיב דמוי גזע בתוך אוכלוסיית התאים. תכונה זו הופכת את NCM460 לשימושי במיוחד למחקרים על התמיינות תאים, הובלת תרופות ותפקודי מחסום אפיתלי.

NCM460 נמצא בשימוש נרחב במחקרים המתמקדים בהתקדמות סרטן המעי הגס, ומאפשר השוואה בין תאים אפיתל נורמליים לחולים. הוא משמש גם כפלטפורמה לחקר ההשפעות של מרכיבי תזונה, תרופות וגורמים חיצוניים אחרים על בריאות ומחלות אפיתל המעי הגס. קו תאים זה מהווה כלי יעיל לקידום ההבנה שלנו של הביולוגיה של מערכת העיכול ברמה התאית והמולקולרית.

Tissue
מעי גס, רירית
Disease
רגיל
Synonyms
  • NCM-460

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תא אפיתל
Tumourigenic
לא, נבדק בעכברים עירומים ובעכברים אטומיים
Doubling time
32-38 שעות

04Identifiers

Citation
NCM460 (מספר קטלוגי Cytion 305430)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0460

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS ו-1% NEAA.
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
68 שנים
Ethnicity
היספני