Pāriet uz saturu
NCM460
Audums
Resnās zarnas, gļotāda
Slimība
Parasts
Sinonīmi
NCM-460

Dokumenti

NCM460

Cell line · Preces numurs 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NCM460 šūnu līnija ir iegūta no normālām cilvēka resnās zarnas gļotādas epitēlija šūnām, kas ir ļoti svarīgs in vitro modelis cilvēka zarnu fizioloģijas un patoloģijas pētījumiem. Šī šūnu līnija tika izveidota no histoloģiski normāliem audiem, kas izolēti kuņģa vēža pacienta operācijas laikā, jo īpaši no šķērsgala resnās zarnas malas, kas uzskatāma par brīvu no ļaundabīgām izmaiņām. NCM460 šūnām piemīt kuņģa-zarnu trakta epitēlija šūnām raksturīgās īpašības, tostarp tādu marķieru kā villīns un cilvēka sekrēcijas komponents ekspresija, kas apstiprina to epitēlija izcelsmi. Svarīgi ir tas, ka šīs šūnas saglabā netumorizējošu fenotipu, par ko liecina to nespēja augt mīkstajā agārā un audzēju neveidošanās nude peļu organismā.

NCM460 šūnu kultivēšanai nepieciešami specializēti apstākļi, lai tās varētu augt kā jaukta suspensijas un monoslāņa sistēma, kas atspoguļo dažādas epitēlija diferenciācijas pakāpes. Mucīna pozitīvu šūnu klātbūtne un neiroendokrīno marķieru ekspresija dažās subpopulācijās liecina par saglabātām daudzlīniju spējām, kas norāda uz cilmes komponentu šūnu populācijā. Šī īpašība padara NCM460 īpaši noderīgu šūnu diferenciācijas, zāļu transporta un epitēlija barjeras funkciju pētījumiem.

NCM460 ir plaši izmantota pētījumos, kas vērsti uz resnās zarnas vēža progresēšanu, ļaujot salīdzināt normālas un slimas epitēlija šūnas. Tas kalpo arī kā platforma, lai pētītu uztura sastāvdaļu, farmaceitisko līdzekļu un citu ārējo faktoru ietekmi uz resnās zarnas epitēlija veselību un slimību. Šī šūnu līnija ir spēcīgs rīks, lai uzlabotu mūsu izpratni par kuņģa un zarnu trakta bioloģiju šūnu un molekulārā līmenī.

Audums
Resnās zarnas, gļotāda
Slimība
Parasts
Sinonīmi
  • NCM-460

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija šūna
Tumorogēns
Nē, testēts ar kailām pelēm un atimiskām pelēm
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
32-38 stundas

04Identifikatori

Atsauce
NCM460 (Cytion kataloga numurs 305430)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0460

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10 % FBS un 1 % NEAA.
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
68 gadi
Etniskā piederība
Latīņamerikāņu