NCM460
Cell line · Product number 305430
The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...
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01General information
- Description
NCM460 细胞系来源于正常人体结肠粘膜上皮细胞,是研究人体肠道生理和病理的重要体外模型。该细胞系是从一名胃癌患者手术中分离出的组织学正常组织中建立的,特别是从被认为无恶性病变的横结肠边缘。NCM460 细胞具有胃肠道上皮细胞的典型特征,包括表达绒毛蛋白和人类分泌成分等标记物,证实了其上皮来源。重要的是,这些细胞保持了非致瘤表型,表现为无法在软琼脂中生长,也不会在裸鼠体内形成肿瘤。
培养 NCM460 细胞需要专门的条件,以支持它们作为混合悬浮单层系统生长,这反映了上皮分化的不同阶段。某些亚群中存在粘蛋白阳性细胞和神经内分泌标志物表达,这表明细胞群中保留了多线能力,表明细胞群中存在干样成分。这一特性使 NCM460 特别适用于细胞分化、药物运输和上皮屏障功能的研究。
NCM460 已被广泛应用于结肠癌进展的研究中,可对正常和患病上皮细胞进行比较。它还是研究饮食成分、药物和其他外部因素对结肠上皮健康和疾病影响的平台。该细胞系为我们在细胞和分子水平上增进对胃肠道生物学的了解提供了强有力的工具。
- Tissue
- 结肠粘膜
- Disease
- 正常
- Synonyms
- NCM-460
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Cell type
- 上皮细胞
- Tumourigenic
- 否,在裸鼠和无胸腺小鼠中进行了测试
- Doubling time
- 32-38 小时
04Identifiers
- Citation
- NCM460(Cytion 目录号 305430)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0460
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 向培养基中添加10%胎牛血清和1%非必需氨基酸混合物。
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
07Donor
- Donor age
- 68岁
- Ethnicity
- 西裔
08Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
