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NCM460
ティッシュ
大腸、粘膜
病気
ノーマル
同義語
NCM-460

NCM460

Cell line · 製品番号 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

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01概要

説明

NCM460細胞株は正常ヒト結腸粘膜上皮細胞由来であり、ヒトの腸の生理・病理を研究するための重要なin vitroモデルとなる。この細胞株は、胃癌患者の手術中に単離された組織学的に正常な組織、特に悪性変化のないと考えられる横行結腸縁から樹立された。NCM460細胞は、ビリンやヒト分泌成分のようなマーカーの発現など、消化管上皮細胞に典型的な特徴を示し、上皮由来であることが確認された。重要なことは、これらの細胞は、軟寒天培地では増殖できず、ヌードマウスでは腫瘍を形成しないことから示されるように、非腫瘍原性の表現型を維持していることである。

NCM460細胞の培養には、上皮分化の様々な段階を反映する混合懸濁単分子層系としての増殖をサポートする特殊な条件が必要である。いくつかの亜集団におけるムチン陽性細胞と神経内分泌マーカーの発現の存在は、細胞集団内に幹細胞のような要素があることを示し、多系統機能が保持されていることを示唆している。この性質により、NCM460は細胞分化、薬物輸送、上皮バリア機能の研究に特に有用である。

NCM460は結腸癌の進行に焦点を当てた研究に広く応用されており、正常上皮細胞と疾患上皮細胞の比較を可能にしている。NCM460はまた、結腸上皮の健康と疾患に対する食事成分、医薬品、その他の外的因子の影響を調べるためのプラットフォームとしても役立っている。この細胞株は、細胞レベルおよび分子レベルで消化管生物学の理解を深めるための強固なツールとなる。

ティッシュ
大腸、粘膜
病気
ノーマル
同義語
  • NCM-460

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
細胞の種類
上皮細胞
腫瘍形成性
ヌードマウスおよび無胸腺マウスで試験済み
倍増時間
32~38時間

04識別子

引用
NCM460 (Cytion カタログ番号 305430)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0460

05取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
68年
民族
ヒスパニック