Ga naar de inhoud
NCM460
Weefsel
Colon, slijmvlies
Ziekte
Normaal
Synoniemen
NCM-460

Documenten

NCM460

Cell line · Productnummer 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De NCM460 cellijn is afgeleid van normale menselijke colon mucosale epitheelcellen en biedt een cruciaal in vitro model voor het bestuderen van de menselijke intestinale fysiologie en pathologie. Deze cellijn is gemaakt van histologisch normaal weefsel dat is geïsoleerd tijdens de operatie van een maagkankerpatiënt, met name van de transversale colonrand die als vrij van kwaadaardige veranderingen werd beschouwd. NCM460 cellen vertonen kenmerken die typisch zijn voor gastro-intestinale epitheelcellen, waaronder de expressie van markers zoals villine en humane secretoire component, wat hun epitheliale oorsprong bevestigt. Belangrijk is dat deze cellen een niet-tumorigene fenotype behouden, zoals blijkt uit hun onvermogen om te groeien in zachte agar en het ontbreken van tumorvorming in naakte muizen.

De kweek van NCM460 cellen vereist speciale omstandigheden om hun groei te ondersteunen als een gemengd suspensie-monolaag systeem, dat verschillende stadia van epitheliale differentiatie weerspiegelt. De aanwezigheid van mucine-positieve cellen en neuro-endocriene marker expressie in sommige subpopulaties suggereert een behouden multilineage vermogen, wat duidt op een stam-achtige component binnen de celpopulatie. Deze eigenschap maakt NCM460 bijzonder nuttig voor studies naar celdifferentiatie, geneesmiddelentransport en epitheliale barrièrefuncties.

NCM460 is op grote schaal toegepast in onderzoek dat zich richt op de progressie van darmkanker, waardoor vergelijkingen tussen normale en zieke epitheelcellen mogelijk zijn. Het dient ook als een platform voor het onderzoeken van de effecten van voedingscomponenten, geneesmiddelen en andere externe factoren op de gezondheid en ziekte van dikke darm epitheelcellen. Deze cellijn biedt een robuust instrument voor het bevorderen van ons begrip van gastro-intestinale biologie op cellulair en moleculair niveau.

Weefsel
Colon, slijmvlies
Ziekte
Normaal
Synoniemen
  • NCM-460

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Epitheelcel
Tumorverwekkend
Nee, getest op naakte muizen en athymische muizen
Verdubbelingstijd
32-38 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NCM460 (Cytion catalogusnummer 305430)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0460

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Voeg aan het medium 10% FBS en 1% NEAA toe.
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
68 jaar
Etnische afkomst
Hispanic