Přejít na obsah
NCM460
Tkáň
Tlusté střevo, sliznice
Nemoc
Normální
Synonyma
NCM-460

Dokumenty

NCM460

Cell line · Číslo výrobku 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie NCM460 je odvozena z normálních epiteliálních buněk lidské sliznice tlustého střeva a představuje důležitý in vitro model pro studium lidské střevní fyziologie a patologie. Tato buněčná linie byla vytvořena z histologicky normální tkáně izolované při operaci pacienta s karcinomem žaludku, konkrétně z příčného okraje tlustého střeva považovaného za prostý maligních změn. Buňky NCM460 vykazují vlastnosti typické pro gastrointestinální epiteliální buňky, včetně exprese markerů, jako je villin a lidská sekreční složka, což potvrzuje jejich epiteliální původ. Důležité je, že tyto buňky si zachovávají nenádorový fenotyp, což se projevuje jejich neschopností růst v měkkém agaru a absencí tvorby nádorů u nahých myší.

Kultivace buněk NCM460 vyžaduje specializované podmínky pro podporu jejich růstu jako systému smíšené suspenze a monovrstvy, což odráží různá stadia epiteliální diferenciace. Přítomnost mucin-pozitivních buněk a exprese neuroendokrinních markerů v některých subpopulacích naznačuje zachovanou schopnost multilineárního vývoje, což svědčí o kmenové složce v populaci buněk. Díky této vlastnosti je NCM460 zvláště užitečný pro studie diferenciace buněk, transportu léčiv a epiteliálních bariérových funkcí.

NCM460 se široce uplatňuje ve výzkumu zaměřeném na progresi rakoviny tlustého střeva a umožňuje porovnávat normální a nemocné epiteliální buňky. Slouží také jako platforma pro zkoumání účinků složek stravy, léčiv a dalších vnějších faktorů na zdraví a onemocnění epitelu tlustého střeva. Tato buněčná linie nabízí spolehlivý nástroj pro lepší pochopení biologie gastrointestinálního traktu na buněčné a molekulární úrovni.

Tkáň
Tlusté střevo, sliznice
Nemoc
Normální
Synonyma
  • NCM-460

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Epitelová buňka
Tumorogenní
Ne, testováno na nahých myších a athymických myších
Doba zdvojnásobení
32-38 hodin

04Identifikátory

Citace
NCM460 (katalogové číslo Cytion 305430)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0460

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA.
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
68 let
Etnická příslušnost
Hispánci