Gå direkte til indholdet
NCM460
Væv
Tyktarm, slimhinde
Sygdom
Normal
Synonymer
NCM-460

Dokumenter

NCM460

Cell line · Varenummer 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

NCM460-cellelinjen stammer fra normale humane tyktarmsslimhindeepitelceller, hvilket giver en kritisk in vitro-model til undersøgelse af human tarmfysiologi og -patologi. Denne cellelinje blev etableret fra histologisk normalt væv, der blev isoleret under en operation fra en mavekræftpatient, specifikt fra den tværgående tyktarmsrand, der blev anset for at være fri for ondartede forandringer. NCM460-celler udviser karakteristika, der er typiske for gastrointestinale epitelceller, herunder udtryk for markører som villin og human sekretorisk komponent, hvilket bekræfter deres epitheliale oprindelse. Det er vigtigt, at disse celler opretholder en ikke-tumorigen fænotype, som det fremgår af deres manglende evne til at vokse i blød agar og manglende tumordannelse i nøgne mus.

Dyrkning af NCM460-celler kræver specialiserede betingelser for at understøtte deres vækst som et blandet suspensions-monolayersystem, der afspejler forskellige stadier af epitelial differentiering. Tilstedeværelsen af mucin-positive celler og udtryk for neuroendokrine markører i nogle subpopulationer tyder på en bevaret multilineage-kapacitet, hvilket indikerer en stamlignende komponent i cellepopulationen. Denne egenskab gør NCM460 særligt nyttig til undersøgelser af celledifferentiering, lægemiddeltransport og epiteliale barrierefunktioner.

NCM460 er blevet anvendt i vid udstrækning i forskning med fokus på progression af tyktarmskræft, hvilket muliggør sammenligninger mellem normale og syge epitelceller. Den fungerer også som en platform til at undersøge virkningerne af kostkomponenter, lægemidler og andre eksterne faktorer på tyktarmsepitelets sundhed og sygdom. Denne cellelinje er et robust værktøj til at fremme vores forståelse af gastrointestinal biologi på cellulært og molekylært niveau.

Væv
Tyktarm, slimhinde
Sygdom
Normal
Synonymer
  • NCM-460

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelcelle
Tumorfremkaldende
Nej, testet i nøgenmus og athymiske mus
Fordoblingstid
32-38 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCM460 (Cytion katalognummer 305430)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0460

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Tilføj 10 % FBS og 1 % NEAA til mediet.
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
68 år
Etnisk tilhørsforhold
Latinamerikansk