NCM460
Cell line · Varenummer 305430
The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...
Tilpasning / Anbefalinger
- NCM460Cell line€800.00
Anbefalet (det nyeste parti)
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
NCM460-cellelinjen stammer fra normale humane tyktarmsslimhindeepitelceller, hvilket giver en kritisk in vitro-model til undersøgelse af human tarmfysiologi og -patologi. Denne cellelinje blev etableret fra histologisk normalt væv, der blev isoleret under en operation fra en mavekræftpatient, specifikt fra den tværgående tyktarmsrand, der blev anset for at være fri for ondartede forandringer. NCM460-celler udviser karakteristika, der er typiske for gastrointestinale epitelceller, herunder udtryk for markører som villin og human sekretorisk komponent, hvilket bekræfter deres epitheliale oprindelse. Det er vigtigt, at disse celler opretholder en ikke-tumorigen fænotype, som det fremgår af deres manglende evne til at vokse i blød agar og manglende tumordannelse i nøgne mus.
Dyrkning af NCM460-celler kræver specialiserede betingelser for at understøtte deres vækst som et blandet suspensions-monolayersystem, der afspejler forskellige stadier af epitelial differentiering. Tilstedeværelsen af mucin-positive celler og udtryk for neuroendokrine markører i nogle subpopulationer tyder på en bevaret multilineage-kapacitet, hvilket indikerer en stamlignende komponent i cellepopulationen. Denne egenskab gør NCM460 særligt nyttig til undersøgelser af celledifferentiering, lægemiddeltransport og epiteliale barrierefunktioner.
NCM460 er blevet anvendt i vid udstrækning i forskning med fokus på progression af tyktarmskræft, hvilket muliggør sammenligninger mellem normale og syge epitelceller. Den fungerer også som en platform til at undersøge virkningerne af kostkomponenter, lægemidler og andre eksterne faktorer på tyktarmsepitelets sundhed og sygdom. Denne cellelinje er et robust værktøj til at fremme vores forståelse af gastrointestinal biologi på cellulært og molekylært niveau.
- Væv
- Tyktarm, slimhinde
- Sygdom
- Normal
- Synonymer
- NCM-460
02Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Mand
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Epitelcelle
- Tumorfremkaldende
- Nej, testet i nøgenmus og athymiske mus
- Fordoblingstid
- 32-38 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- NCM460 (Cytion katalognummer 305430)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0460
05Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Tilføj 10 % FBS og 1 % NEAA til mediet.
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
07Donor
- Donorens alder
- 68 år
- Etnisk tilhørsforhold
- Latinamerikansk
08Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja
