Tartalomra ugrás
NCM460
Szövet
Vastagbél, nyálkahártya
Betegség
Normál
Szinonimák
NCM-460

Dokumentumok

NCM460

Cell line · Termékszám 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az NCM460 sejtvonal normál humán vastagbélnyálkahártya-nyálkahártya hámsejtekből származik, és kritikus in vitro modellt biztosít a humán bél élettanának és patológiájának tanulmányozásához. Ezt a sejtvonalat egy gyomorrákos beteg műtétje során izolált, szövettanilag normális szövetből hozták létre, kifejezetten a rosszindulatú elváltozásoktól mentesnek tekintett haránt vastagbélszegélyből. Az NCM460 sejtek a gasztrointesztinális epitélsejtekre jellemző tulajdonságokkal rendelkeznek, beleértve az olyan markerek kifejeződését, mint a villin és a humán szekréciós komponens, ami megerősíti epitél eredetüket. Fontos, hogy ezek a sejtek nem tumorigén fenotípust tartanak fenn, amit az is bizonyít, hogy nem képesek lágy agarban növekedni, és nem képeznek tumort meztelen egerekben.

Az NCM460 sejtek tenyésztéséhez speciális körülményekre van szükség, hogy vegyes szuszpenziós-monoréteges rendszerként támogassák növekedésüket, ami a hámdifferenciálódás különböző stádiumait tükrözi. A mucin-pozitív sejtek jelenléte és a neuroendokrin markerek expressziója egyes alpopulációkban arra utal, hogy a sejtpopulációban megmaradt a többvonalas képesség, ami egy őssejt-szerű komponensre utal. Ez a tulajdonság teszi az NCM460-at különösen hasznossá a sejtdifferenciálódás, a gyógyszer-transzport és az epithelialis barrierfunkciók vizsgálatára.

Az NCM460-at széles körben alkalmazták a vastagbélrák progressziójára összpontosító kutatásokban, lehetővé téve a normális és a beteg epitélsejtek összehasonlítását. Emellett platformként szolgál az étrendi összetevők, gyógyszerek és egyéb külső tényezők vastagbélhám egészségére és betegségére gyakorolt hatásainak vizsgálatához. Ez a sejtvonal robusztus eszközt kínál a gyomor-bélrendszer biológiájának sejtszintű és molekuláris szintű megértéséhez.

Szövet
Vastagbél, nyálkahártya
Betegség
Normál
Szinonimák
  • NCM-460

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Epithelsejt
Daganatképző
Nem, meztelen egereken és atímiás egereken tesztelték
Kettőzési idő
32-38 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
NCM460 (Cytion katalógusszám: 305430)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0460

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
Kiegészítse a táptalajt 10% FBS-sel és 1% NEAA-val.
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
68 év
Etnikai hovatartozás
Spanyolul