İçeriğe atla
NCM460
Doku
Kolon, mukoza
Hastalık
Normal
Eş anlamlılar
NCM-460

NCM460

Cell line · Ürün numarası 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NCM460 hücre hattı, normal insan kolon mukozal epitel hücrelerinden türetilmiştir ve insan bağırsak fizyolojisi ve patolojisini incelemek için kritik bir in vitro model sağlar. Bu hücre hattı, bir mide kanseri hastasından ameliyat sırasında izole edilen histolojik olarak normal dokudan, özellikle de malign değişikliklerin olmadığı düşünülen transvers kolon kenarından oluşturulmuştur. NCM460 hücreleri, epitelyal kökenlerini doğrulayan villin ve insan salgı bileşeni gibi belirteçlerin ifadesi de dahil olmak üzere gastrointestinal epitel hücrelerinin tipik özelliklerini sergilemektedir. Daha da önemlisi, bu hücreler, yumuşak agarda büyüyememeleri ve çıplak farelerde tümör oluşumunun olmamasıyla gösterildiği gibi, tümörijenik olmayan bir fenotip sürdürmektedir.

NCM460 hücrelerinin kültürü, epitelyal farklılaşmanın çeşitli aşamalarını yansıtan karışık bir süspansiyon-monolayer sistemi olarak büyümelerini desteklemek için özel koşullar gerektirir. Bazı alt popülasyonlarda müsin-pozitif hücrelerin ve nöroendokrin marker ekspresyonunun varlığı, hücre popülasyonu içinde kök benzeri bir bileşenin göstergesi olan, korunmuş bir çok aşamalı kabiliyete işaret etmektedir. Bu özellik NCM460'ı hücre farklılaşması, ilaç taşınması ve epitelyal bariyer işlevleri üzerine yapılan çalışmalar için özellikle yararlı kılmaktadır.

NCM460, normal ve hastalıklı epitel hücreleri arasında karşılaştırma yapılmasına olanak tanıyarak kolon kanseri ilerlemesine odaklanan araştırmalarda yaygın olarak uygulanmıştır. Ayrıca diyet bileşenlerinin, farmasötiklerin ve diğer dış faktörlerin kolon epitel sağlığı ve hastalığı üzerindeki etkilerini araştırmak için bir platform görevi görür. Bu hücre hattı, hücresel ve moleküler düzeylerde gastrointestinal biyoloji anlayışımızı ilerletmek için sağlam bir araç sunmaktadır.

Doku
Kolon, mukoza
Hastalık
Normal
Eş anlamlılar
  • NCM-460

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Epitel hücre
Tümör oluşturucu
Hayır, çıplak farelerde ve atimik farelerde test edilmiştir
İki katına çıkma süresi
32-38 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCM460 (Cytion katalog numarası 305430)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0460

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin.
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
68 yıl
Etnik köken
Hispanik