Skip to content
NCM460
Tissue
Colon, mucosa
Disease
Normal
Synonyms
NCM-460

Documents

NCM460

Cell line · Product number 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La línea celular NCM460 se deriva de células epiteliales normales de la mucosa del colon humano, lo que la convierte en un modelo in vitro fundamental para el estudio de la fisiología y la patología intestinal humana. Esta línea celular se estableció a partir de tejido histológicamente normal aislado durante una cirugía realizada a un paciente con cáncer gástrico, específicamente del margen del colon transverso que se consideró libre de cambios malignos. Las células NCM460 presentan características típicas de las células epiteliales gastrointestinales, incluida la expresión de marcadores como la villina y el componente secretor humano, lo que confirma su origen epitelial. Es importante destacar que estas células mantienen un fenotipo no tumorigénico, como lo demuestran su incapacidad para crecer en agar blando y la ausencia de formación de tumores en ratones desnudos.

El cultivo de las células NCM460 requiere condiciones especializadas para favorecer su crecimiento como un sistema mixto de suspensión y monocapa, lo que refleja las distintas etapas de la diferenciación epitelial. La presencia de células positivas para mucina y la expresión de marcadores neuroendocrinos en algunas subpoblaciones sugiere una capacidad multilinaje conservada, lo que indica la existencia de un componente de tipo celular madre dentro de la población celular. Esta propiedad hace que las NCM460 sean particularmente útiles para estudios sobre la diferenciación celular, el transporte de fármacos y las funciones de la barrera epitelial.

La línea NCM460 se ha utilizado ampliamente en investigaciones centradas en la progresión del cáncer de colon, lo que permite realizar comparaciones entre células epiteliales normales y enfermas. También sirve como plataforma para investigar los efectos de los componentes de la dieta, los fármacos y otros factores externos sobre la salud y la enfermedad del epitelio del colon. Esta línea celular ofrece una herramienta sólida para avanzar en nuestra comprensión de la biología gastrointestinal a nivel celular y molecular.

Tissue
Colon, mucosa
Disease
Normal
Synonyms
  • NCM-460

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Cell type
Célula epitelial
Tumourigenic
No, se han realizado pruebas en ratones desnudos y ratones atímicos
Doubling time
32-38 horas

04Identifiers

Citation
NCM460 (número de catálogo de Cytion 305430)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0460

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS y un 1 % de NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

07Donor

Donor age
68 años
Ethnicity
Hispano