NCM460
Cell line · Product number 305430
The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...
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01General information
- Description
La línea celular NCM460 se deriva de células epiteliales normales de la mucosa del colon humano, lo que la convierte en un modelo in vitro fundamental para el estudio de la fisiología y la patología intestinal humana. Esta línea celular se estableció a partir de tejido histológicamente normal aislado durante una cirugía realizada a un paciente con cáncer gástrico, específicamente del margen del colon transverso que se consideró libre de cambios malignos. Las células NCM460 presentan características típicas de las células epiteliales gastrointestinales, incluida la expresión de marcadores como la villina y el componente secretor humano, lo que confirma su origen epitelial. Es importante destacar que estas células mantienen un fenotipo no tumorigénico, como lo demuestran su incapacidad para crecer en agar blando y la ausencia de formación de tumores en ratones desnudos.
El cultivo de las células NCM460 requiere condiciones especializadas para favorecer su crecimiento como un sistema mixto de suspensión y monocapa, lo que refleja las distintas etapas de la diferenciación epitelial. La presencia de células positivas para mucina y la expresión de marcadores neuroendocrinos en algunas subpoblaciones sugiere una capacidad multilinaje conservada, lo que indica la existencia de un componente de tipo celular madre dentro de la población celular. Esta propiedad hace que las NCM460 sean particularmente útiles para estudios sobre la diferenciación celular, el transporte de fármacos y las funciones de la barrera epitelial.
La línea NCM460 se ha utilizado ampliamente en investigaciones centradas en la progresión del cáncer de colon, lo que permite realizar comparaciones entre células epiteliales normales y enfermas. También sirve como plataforma para investigar los efectos de los componentes de la dieta, los fármacos y otros factores externos sobre la salud y la enfermedad del epitelio del colon. Esta línea celular ofrece una herramienta sólida para avanzar en nuestra comprensión de la biología gastrointestinal a nivel celular y molecular.
- Tissue
- Colon, mucosa
- Disease
- Normal
- Synonyms
- NCM-460
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Cell type
- Célula epitelial
- Tumourigenic
- No, se han realizado pruebas en ratones desnudos y ratones atímicos
- Doubling time
- 32-38 horas
04Identifiers
- Citation
- NCM460 (número de catálogo de Cytion 305430)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0460
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS y un 1 % de NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
07Donor
- Donor age
- 68 años
- Ethnicity
- Hispano
08Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
