NCM460
Cell line · Product number 305430
The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...
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01General information
- Description
NCM460 細胞系源自正常人類結腸黏膜上皮細胞,為研究人類腸道生理與病理提供了關鍵的體外模型。該細胞系是從一名胃癌患者手術中分離出的組織學上正常的組織建立而來,具體而言,是取自被認為未發生惡性變化的橫結腸邊緣部位。 NCM460 細胞展現出胃腸道上皮細胞的典型特徵,包括表達絨毛蛋白(villin)和人類分泌成分(human secretory component)等標記物,這證實了其上皮起源。重要的是,這些細胞維持著非致瘤性表型,這從其無法在軟瓊脂中生長,以及在裸鼠體內未形成腫瘤即可證實。
NCM460 細胞的培養需要特殊的條件,以支持其作為混合懸浮-單層系統的生長,這反映了上皮分化的不同階段。 部分亞群中存在黏蛋白陽性細胞及神經內分泌標記物的表達,暗示其保留了多系分化能力,表明該細胞群中存在幹細胞樣成分。此特性使 NCM460 特別適用於細胞分化、藥物轉運及上皮屏障功能的研究。
NCM460 已廣泛應用於聚焦於結腸癌進展的研究,便於對比正常與病變的上皮細胞。它同時也作為一個平台,用於探究膳食成分、藥品及其他外部因素對結腸上皮健康與疾病的影響。 此細胞系提供了一種強大的工具,有助於深化我們對胃腸道生物學在細胞與分子層面的理解。
- Tissue
- 結腸,黏膜
- Disease
- 正常
- Synonyms
- NCM-460
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
- Cell type
- 上皮細胞
- Tumourigenic
- 不,是在裸鼠和無胸腺鼠身上進行測試的
- Doubling time
- 32至38小時
04Identifiers
- Citation
- NCM460(Cytion 型號 305430)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0460
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM,含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉(Cytion 產品編號 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Donor age
- 68年
- Ethnicity
- 拉丁裔
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
