Перейти до вмісту
NCM460
Тканина
Товста кишка, слизова оболонка
Хвороба
Нормально
Синоніми
NCM-460

Документи

NCM460

Cell line · Номер товару 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія NCM460 отримана з нормальних епітеліальних клітин слизової оболонки товстої кишки людини, що забезпечує критично важливу модель in vitro для вивчення фізіології та патології кишечника людини. Ця клітинна лінія була створена з гістологічно нормальної тканини, виділеної під час операції у пацієнта з раком шлунка, а саме з поперечного краю товстої кишки, який вважався вільним від злоякісних змін. Клітини NCM460 мають характеристики, характерні для епітеліальних клітин шлунково-кишкового тракту, включаючи експресію таких маркерів, як вілін і людський секреторний компонент, що підтверджує їх епітеліальне походження. Важливо, що ці клітини зберігають непухлинний фенотип, про що свідчить їхня нездатність рости в м'якому агарі та відсутність утворення пухлин у голих мишей.

Культура клітин NCM460 вимагає спеціалізованих умов для підтримки їх росту у вигляді змішаної системи суспензія-моношар, що відображає різні стадії епітеліальної диференціації. Наявність муцин-позитивних клітин та експресія нейроендокринних маркерів у деяких субпопуляціях свідчить про збережену здатність до багатолінійності, що вказує на наявність стовбурового компонента в клітинній популяції. Ця властивість робить NCM460 особливо корисною для досліджень клітинної диференціації, транспорту ліків і бар'єрних функцій епітелію.

NCM460 широко застосовується в дослідженнях прогресування раку товстої кишки, дозволяючи порівнювати нормальні та хворі епітеліальні клітини. Вона також слугує платформою для вивчення впливу компонентів дієти, фармацевтичних препаратів та інших зовнішніх факторів на здоров'я та захворювання епітелію товстої кишки. Ця клітинна лінія пропонує надійний інструмент для поглиблення нашого розуміння біології шлунково-кишкового тракту на клітинному та молекулярному рівнях.

Тканина
Товста кишка, слизова оболонка
Хвороба
Нормально
Синоніми
  • NCM-460

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Тип клітини
Епітеліальна клітина
Пухлиноутворювальний
Ні, протестовано на голих мишах та мишах з атимією
Час подвоєння
32-38 годин

04Ідентифікатори

Посилання
NCM460 (номер за каталогом Cytion 305430)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0460

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
ДМЕМ, w: 4,5 г/л Глюкоза, w: 4 мМ L-глутамін, w: 3,7 г/л NaHCO3, w: 1,0 мМ піруват натрію (цит. номер 820300a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS і 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Вік донора
68 років
Етнічна приналежність
Латиноамериканець