Skip to content
NCM460
Tissue
Đại tràng, niêm mạc
Disease
Bình thường
Synonyms
NCM-460

Documents

NCM460

Cell line · Product number 305430

The NCM460 cell line is derived from normal human colon mucosal epithelial cells, providing a critical in vitro model for studying human intestinal physio...

€800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào NCM460 được phân lập từ các tế bào biểu mô niêm mạc ruột kết bình thường của người, cung cấp một mô hình in vitro quan trọng để nghiên cứu sinh lý và bệnh lý ruột người. Dòng tế bào này được thiết lập từ mô bình thường về mặt mô học được tách ra trong quá trình phẫu thuật từ bệnh nhân ung thư dạ dày, cụ thể là từ vùng biên của ruột kết ngang được coi là không có thay đổi ác tính. Tế bào NCM460 có các đặc điểm điển hình của tế bào biểu mô đường tiêu hóa, bao gồm biểu hiện các dấu hiệu như villin và thành phần tiết của người, xác nhận nguồn gốc biểu mô của chúng. Đặc biệt, các tế bào này duy trì biểu hiện không gây ung thư, được chứng minh qua khả năng không phát triển trong agar mềm và không hình thành khối u ở chuột nude.

Việc nuôi cấy tế bào NCM460 yêu cầu điều kiện chuyên biệt để hỗ trợ sự phát triển của chúng dưới dạng hệ thống hỗn hợp treo-lớp đơn, phản ánh các giai đoạn khác nhau của quá trình biệt hóa biểu mô. Sự hiện diện của các tế bào dương tính với mucin và biểu hiện dấu hiệu thần kinh nội tiết trong một số quần thể con cho thấy khả năng đa dòng được duy trì, cho thấy thành phần tương tự tế bào gốc trong quần thể tế bào. Tính chất này khiến NCM460 đặc biệt hữu ích cho các nghiên cứu về biệt hóa tế bào, vận chuyển thuốc và chức năng hàng rào biểu mô.

NCM460 đã được ứng dụng rộng rãi trong nghiên cứu về tiến triển ung thư đại tràng, cho phép so sánh giữa các tế bào biểu mô bình thường và bệnh lý. Nó cũng là nền tảng để nghiên cứu tác động của các thành phần dinh dưỡng, thuốc và các yếu tố bên ngoài khác đối với sức khỏe và bệnh lý của biểu mô đại tràng. Dòng tế bào này cung cấp một công cụ mạnh mẽ để nâng cao hiểu biết về sinh học tiêu hóa ở cấp độ tế bào và phân tử.

Tissue
Đại tràng, niêm mạc
Disease
Bình thường
Synonyms
  • NCM-460

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Cell type
Tế bào biểu mô
Tumourigenic
Không, đã được thử nghiệm trên chuột không có tuyến ức và chuột không có tuyến ức
Doubling time
32-38 giờ

04Identifiers

Citation
NCM460 (Số catalog Cytion 305430)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0460

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 1% NEAA.
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
68 năm
Ethnicity
Người Hispanic