Innledning

NCI-H1781-celler, også kjent under synonymene H1781, H-1781 og NCIH1781 (Cellosaurus-tilgangsnummer CVCL_1494), er en humant ikke-småcellet lungekreftcellelinje (NSCLC) som ble etablert gjennom det systematiske NCI-programmet for lungekreftcellelinjer og først katalogisert i cellelinjedatabasen til NCI-Navy Medical Oncology Branch. [1] Denne cellelinjen ble en hjørnesteinsmodell i forskningen på ikke-småcellet lungekreft (NSCLC) fordi den bærer en aktiverende HER2-eksons 20-innsettingsmutasjon (G776insV_G/C, dvs. en glycin-776→valin/cystein-delisjon, også skrevet som A775insV,G776C), en klasse av drivermutasjoner som forekommer i omtrent 2–3 % av lungeadenokarsinomene. Denne unike genetiske bakgrunnen har gjort NCI-H1781 uunnværlig for evaluering av HER2-rettede kinasinhibitorer, studier av resistensmekanismer og karakterisering av nedstrøms onkogen signalering. Storskala genomiske initiativer, blant annet Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) og Cancer Dependency Map-prosjektet, har ytterligere annotert linjen med multi-omiske datasett, noe som utvider dens anvendelighet til farmakogenomiske studier av alle kreftformer. [2]

Hovedpunkter

• NCI-H1781 bærer en aktiverende HER2-eksons 20-innsettingsmutasjon (G776insV_G/C, også skrevet som A775insV,G776C) som konstant aktiverer HER2- og EGFR-signalveiene.
• Cellelinjen er den viktigste in vitro-modellen for testing av irreversible og reversible HER2-kinasehemmere ved ikke-småcellet lungekreft (NSCLC).
• Homozygote TP53-mutasjoner (p.Val157Phe) og heterozygote PTEN-rammeskiftmutasjoner forekommer sammen med HER2-drivermutasjonen.
• Omfattende multi-omisk annotering (sekvensering av hele eksomet, RNA-sekvensering, proteomikk, SNP-arrays, legemiddelscreening) er offentlig tilgjengelig gjennom store konsortieprosjekter.
• Cellelinjen er iboende resistent mot EGFR-selektive tyrosinkinasehemmere som gefitinib og erlotinib, noe som gjør den til en verdifull resistensmodell.

Hva er NCI-H1781?

NCI-H1781 ble isolert fra pleuralvæsken til en 66 år gammel kvinnelig pasient som hadde fått diagnosen minimalt invasivt lungeadenokarsinom. Cellelinjen ble generert som en del av NCI-programmet for interne lungekreftcellelinjer, et systematisk arbeid som ble påbegynt i 1976 for å skape omfattende annoterte humane kreftmodeller. [3] Det karakteristiske genetiske trekket er en heterozygot in-frame-insersjon i HER2-ekson 20, som fører til at det oppstår ekstra aminosyrer i posisjon 776 i kinasedomenet, noe som resulterer i en konstant aktiv reseptor. Linjen bærer også en homozygot TP53-missense-mutasjon (p.Val157Phe), som opprinnelig ble identifisert av Mitsudomi og kolleger, [4] og en heterozygot PTEN-rammeskiftmutasjon (p.Gln245fs*6) som er dokumentert gjennom omfattende eksomsekvenseringsprosjekter. [2] [8] Analysen av mikrosatellittinstabilitet klassifiserer linjen som MSI-lav, og estimeringen av genetisk opphav plasserer den hovedsakelig innenfor en nord- og søreuropeisk genetisk bakgrunn. [5] Det er avgjørende at EGFR i seg selv er av villtype i denne cellelinjen, slik at medikamentfølsomheten utelukkende skyldes den muterte HER2-reseptoren, noe som gir en ren modell for å analysere HER2-spesifikk onkogen signalering.

Informasjon om cellekultur

Fordelene ved NCI-H1781

Den viktigste fordelen med NCI-H1781 er den genetisk definerte HER2-eksons 20-innsettingsmutasjonen på en EGFR-bakgrunn av villtype. Denne kombinasjonen gjør det mulig for forskere å tilskrive responsen på legemidlet entydig til HER2-hemming, snarere enn til kryssaktivitet fra EGFR. Siden denne mutasjonsklassen rammer omtrent 2–3 % av alle pasienter med lungeadenokarsinom og det historisk sett har manglet godkjente behandlinger, fyller NCI-H1781 et viktig behov som cellelinjer med EGFR-mutasjoner ikke kan dekke. Cellelinjen inntar derfor en unik posisjon som det mest brukte cellulære referansepunktet for utvikling av legemidler mot HER2-drevet ikke-småcellet lungekreft (NSCLC).

Multi-omisk karakterisering innenfor rammen av store konsortier styrker linjens forskningsverdi ytterligere. NCI-H1781 er blitt profilert ved hjelp av hel-eksomsekvensering, SNP-arrays, RNA-sekvensering, mikroarray, DNA-metyleringsanalyse, reversfase-proteinarrays og legemiddelscreeningspaneler. [2] [6] [7] [8] Denne detaljgraden i annotasjonene gjør det mulig for forskere å integrere sine egne farmakologiske funn med eksisterende multi-omiske datasett, noe som fremskynder utviklingen av hypoteser betydelig. Høy levedyktighet etter opptining (97,5 %) og jevn levedyktighet ved subkultivering på over 97 % sikrer at eksperimentresultatene er reproduserbare gjennom flere passasjer.

NCI-H1781 fungerer også godt som en intern negativ kontroll for EGFR-rettede midler. Siden EGFR er av villtype og cellelinjen i seg selv er ufølsom for første generasjons EGFR-tyrosinkinasehemmere (TKI-er), muliggjør den en direkte sammenligning med cellelinjer med EGFR-mutasjoner, noe som gir en mer presis mekanistisk tolkning. Dens inkludering i genomomfattende screeninger for sletting av polaritetsgener [9] og studier av avhengighet av KRAS-effektorer [10] illustrerer bredden i forskningssammenhenger der denne analyselinjen gir nyttige data utover sin klassiske rolle i forbindelse med HER2.

Begrensninger ved NCI-H1781

NCI-H1781 bærer samtidig forekommende mutasjoner i TP53 og PTEN som kan forstyrre tolkningen av data om respons på legemidler. Den homozygote TP53 p.Val157Phe-substitusjonen kan endre p53-avhengig apoptotisk signalering, noe som potensielt kan påvirke omfanget av celledød som observeres etter legemiddelbehandling. På samme måte kan haploinsuffisiens i PTEN aktivere PI3K–AKT-signalveien uavhengig av HER2, noe som skaper en bakgrunn av konstant overlevelsessignalering som kan maskere eller overdrive effekten av hemmere. Forskere bør derfor vurdere å gjennomføre parallelle eksperimenter i isogene systemer når de skal tilskrive fenotyper spesifikt til HER2.

Som en veletablert cellelinje fra én enkelt donor gjenspeiler NCI-H1781 ikke den fulle intratumorale heterogeniteten som finnes i pasienters svulster. Klonal utvikling under kontinuerlig passasje kan føre til ytterligere genetiske endringer som ikke var til stede i den opprinnelige svulsten. Autentisering ved hjelp av STRP-profilering og regelmessig mykoplasmatesting er fortsatt avgjørende kvalitetskontrolltiltak, og store cellelinjekataloger har understreket betydningen av disse metodene for å opprettholde datakredibiliteten. [11]

Cellelinjen har også begrenset anvendbarhet i sammenhenger utover lungeadenokarsinom med HER2-eksons 20-insersjoner. Studier som krever EGFR-aktiverende mutasjoner, KRAS-drivermutasjoner eller andre histologiske undertyper av ikke-småcellet lungekreft (NSCLC), krever komplementære cellelinjer. I tillegg gjengir den, som en todimensjonal monolagsmodell, ikke det tredimensjonale tumormikromiljøet, vaskulariseringen eller immuninteraksjonene som finnes in vivo, noe som understreker behovet for påfølgende validering ved hjelp av xenotransplantater eller organoider.

STR-autentisert, mykoplasmafri, klar til levering. Se fullstendige spesifikasjoner og bestill her

Anvendelser

Evaluering av HER2-rettet kinasinhibitor

NCI-H1781 er referansecellelinjen for evaluering av HER2-rettede kinasinhibitorer ved ikke-småcellet lungekreft (NSCLC). Den banebrytende studien av Shimamura, Ji og Minami viste at den irreversible doble EGFR/HER2-hemmeren HKI-272 (neratinib) kraftig hemmet proliferasjonen av NCI-H1781-celler med G776insV_G/C-mutasjonen, noe som førte til G1-cellesyklusstans og apoptotisk død. [12] Av avgjørende betydning var det også at denne studien viste at HKI-272 opphevet autofosforylering av både HER2 og EGFR, og dermed etablerte et mekanistisk grunnlag for å målrette denne mutasjonsklassen med irreversible hemmere. [12]

På bakgrunn av dette bekreftet senere studier virkningen av ytterligere irreversible pan-HER-hemmere. MP-412 (AV-412), en dobbel EGFR/ErbB2-hemmer, undertrykte fosforylering av ERBB2 og nedstrøms signalering i NCI-H1781-xenotransplantatmodeller, og demonstrerte in vivo antitumoraktivitet i samsvar med in vitro-funnene. [13] Pan-HER-hemmeren tarloxotinib-E, et hypoksiaktivert prodrug, ble også evaluert mot NCI-H1781 sammen med Ba/F3-celler som uttrykker individuelle HER2-mutasjoner, og resistensmekanismer mot dette middelet ble undersøkt gjennom mutagenesescreeninger med N-etyl-N-nitrosourea. [14]

Studier som evaluerte den reversible HER2-hemmeren sevabertinib, rapporterte sterk antiproliferativ aktivitet i NCI-H1781-celler med A775insV,G776C-insersjon i ekson 20 (_IC₅₀ = 19,7 nmol/L), noe som plasserer sevabertinib blant de mest potente reversible inhibitorene som er testet i denne modellen. Sevabertinibs aktivitetsprofil i NCI-H1781 ble karakterisert sammen med undertrykkelse av nedstrøms signalveier, noe som understreker linjens nytteverdi for direkte sammenligninger mellom klasser av reversible og irreversible HER2-hemmere. Den antitumorale effekten av neratinib mot lungekreftceller med HER2-onkogenmutasjoner ble på tilsvarende måte karakterisert ved bruk av NCI-H1781 parallelt med kontrollgrupper med villtype- og amplifisert HER2, noe som ytterligere understreker modellens sentrale rolle på dette feltet.

Resistensmekanismer for EGFR-TKI-er

En viktig anvendelse av NCI-H1781 er modellering av intrinsisk resistens mot første generasjons EGFR-TKI-er. Wang og kolleger viste at HER2-YVMA-insersjonen transfosforylerte både kinase-inaktiverte og villtype-EGFR selv i nærvær av EGFR-TKI-er, noe som forklarer hvorfor gefitinib og erlotinib ikke klarer å undertrykke signaleringen i denne cellelinjen. [15] Knockdown av mutant HER2 i H1781-celler gjenopprettet følsomheten for EGFR-TKI-er og økte apoptosen, noe som viser at HER2 fungerer som den primære drivkraften bak TKI-resistens i denne sammenhengen. [15]

Gadgeel og kolleger bekreftet denne resistensfenotypen ved å sammenligne NCI-H1781 (EGFR av villtype) med EGFR-muterte NSCLC-cellelinjer i eksperimenter med dobbel blokkering av EGFR og COX-2. [16] Dataene fra NCI-H1781 viste at samtidig behandling med erlotinib og celecoxib ikke ga noen additiv fordel i celler med villtype-EGFR, noe som understreker at EGFR-mutasjonsstatusen styrer responsen på EGFR-rettede kombinasjonsstrategier. [16] Disse funnene posisjonerte NCI-H1781 som en verdifull negativ kontroll for EGFR-sentriske kombinasjonsstudier.

Forskning med (-)-epigallokatekin-3-gallat-derivater kombinert med cisplatin eller paklitaksel benyttet videre NCI-H1781 som en sammenligningslinje for NSCLC med villtype-EGFR, der man undersøkte fosforyleringsendringer i EGFR-signalveien. Disse studiene viste at cytotoksiske kombinasjoner kunne undertrykke nedstrøms EGFR-signalering selv i fravær av aktiverende EGFR-mutasjoner. Dette forskningsarbeidet demonstrerer samlet sett linjens verdi som en eksperimentell kontroll som skiller HER2-spesifikke fra EGFR-spesifikke farmakologiske effekter.

Forskning på antistoff-legemiddelkonjugater og kombinasjonsbehandling

NCI-H1781 har blitt brukt til å undersøke aktiviteten til HER2-rettede antistoff-legemiddelkonjugater (ADC-er) i NSCLC. Cretella og kolleger påviste at trastuzumab emtansine (T-DM1), et ADC bestående av trastuzumab konjugert til mikrotubuli-hemmeren DM1, utøvde antiproliferative og proapoptotiske effekter i HER2-overekspresserende NSCLC-linjer og overvant gefitinib-resistens in vitro. [17] Dette arbeidet var blant de første som systematisk undersøkte T-DM1-aktiviteten i lungekreft fremfor brystkreft, der NCI-H1781 utgjorde konteksten for HER2-mutert lungeadenokarsinom. [17]

Wang og kolleger påviste at klassiske HER2-rettede midler, inkludert lapatinib, trastuzumab og den irreversible pan-HER-hemmeren CI-1033, alle hemmet veksten av NCI-H1781-celler, noe som bekreftet flere mekanistiske tilnærminger til HER2-undertrykkelse. [15] Disse sammenlignende dataene var avgjørende for å definere spekteret av midler som virker mot HER2-eksons 20-insersjoner. Tilnærminger innen nettverksfarmakologi har også benyttet NCI-H1781 som en in vitro-modell for ikke-småcellet lungekreft (NSCLC) for å evaluere levedyktighet, apoptose og klonogenisitet etter kombinasjonsbehandling med nye plantebaserte forbindelser, noe som illustrerer modellens allsidighet for screening av ulike terapeutiske modaliteter.

Genomisk og proteomisk profilering av alle kreftformer

NCI-H1781 er en av de mest omfattende annoterte linjene innenfor storskala ressurser for kreftcellelinjer. Cancer Cell Line Encyclopedia har samlet data om genuttrykk, kromosomalt kopitall og massivt parallell sekvensering fra hundrevis av cellelinjer for å muliggjøre prediktiv modellering av legemiddelfølsomhet, der NCI-H1781 bidrar som en dokumentert NSCLC-modell. [2] Utvidelsen av CCLE til neste generasjon tilførte lag med RNA-spleising, DNA-metylering, histon H3-modifikasjon og mikroRNA-ekspresjon, noe som ytterligere utdypet det molekylære bildet av NCI-H1781. [8]

Proteomiske studier har utfylt de genomiske datasettene for NCI-H1781. Karakterisering ved hjelp av reversfase-proteinarray målte ekspresjonsnivåene til omtrent 230 sentrale kreftrelaterte proteiner på tvers av mer enn 650 cellelinjer, og viste at fosfoproteinprofiler gir økt prediktiv evne for legemiddelfølsomhet utover det som er tilgjengelig fra mRNA-data alene. [7] Det pan-kreftproteomiske kartet over 949 humane kreftcellelinjer, generert ved hjelp av massespektrometri, kvantifiserte videre over 8 000 proteiner, med NCI-H1781 inkludert blant representantene for ikke-småcellet lungekreft (NSCLC). [18]

Transkriptomiske ressurser har bidratt med ytterligere oppløsning. En omfattende RNA-sekvenseringsstudie av 675 humane kreftcellelinjer kartla genuttrykk, mutasjoner og genfusjoner, og ga en transkripsjonell referanse for NCI-H1781 som støtter signalveibaserte analyser. [6] TCLP-ressursen kompletterte disse dataene ved å bestemme HLA-type, identifisere uttrykte virus og forutsi neoepitoper i over 1 000 cellelinjer, inkludert NCI-H1781, noe som åpnet nye veier for forskning knyttet til immunterapi. [19] Proteomiske profileringsstudier identifiserte også forskjellig aktiverte signalveier mellom SCLC- og NSCLC-linjer, der NCI-H1781 fungerte som en NSCLC-referanse. [20]

Screening av nye forbindelser og farmakogenomikk

NCI-H1781 er blitt innlemmet i storskala farmakogenomiske screeninger som kartlegger genetiske endringer i forhold til legemiddelfølsomhet. En oversikt over farmakogenomiske interaksjoner på tvers av mer enn 1 000 kreftcellelinjer korrelerte somatiske mutasjoner, endringer i kopitall, DNA-metylering og genuttrykk med følsomhet overfor 265 legemidler, der NCI-H1781 bidro med data om HER2-drevne følsomhetsmønstre. [21] Et «chemistry-first»-paradigme for legemiddelutvikling screenet et bibliotek med 200 000 forbindelser på tvers av mer enn 100 lungekreftcellemodeller, der NCI-H1781 ble brukt som en del av et representativt utvalg av karakteristiske somatiske lesjoner ved lungekreft. [22]

Profilering av KRAS-effektoravhengighet ved hjelp av kombinatoriske siRNA-screeninger i 92 cellelinjer inkluderte NCI-H1781 for å karakterisere hvordan ulike onkogenotyper aktiverer forskjellige effektorknuter, noe som bidro til en bredere forståelse av signalheterogeniteten i lungekreft. [10] RB-relaterte genuttrykk-analyser på over 100 NSCLC-linjer bekreftet intakt RB-uttrykk i NCI-H1781, noe som ga kontekst for studier av regulering av cellesyklusen. [23] I tillegg identifiserte genomomfattende screening for mikrodelesjoner forstyrrelser i polaritetskompleksgenet på tvers av 684 kreftcellelinjer, der data fra NCI-H1781 bidro til karakteriseringen av potensielle nye tumorsuppressormekanismer. [9]

Estimat av etnisk opprinnelse i nesten 1 400 kreftcellelinjer klassifiserte NCI-H1781 innenfor en overveiende europeisk genetisk bakgrunn, en klassifisering som er relevant for tolkning av populasjonsspesifikke farmakogenomiske funn og for å sikre mangfold i legemiddelscreeningspaneler. [5] Samlet sett viser disse farmakogenomiske anvendelsene at NCI-H1781 bidrar med verdifulle HER2-spesifikke datapunkter innenfor rammeverk for legemiddelutvikling med flere cellelinjer, noe som gjør det mulig for forskere å identifisere genetiske prediktorer for følsomhet eller resistens i stor skala.

Konklusjon

NCI-H1781 (CVCL_1494) fremstår som den fremste cellemodellen for HER2-eksons 20-innsetting-drevet ikke-småcellet lungekreft (NSCLC), og tilbyr en genetisk veldefinert plattform for evaluering av målrettede kinasinhibitorer, karakterisering av resistensmekanismer og bidrag til pan-kreft-multiomiske konsortier. Fra den banebrytende påvisningen av HKI-272-aktivitet i 2006 [12] til moderne studier av reversible HER2-hemmere og antistoff-legemiddelkonjugater har linjen gjentatte ganger bevist sin translatoriske relevans. Den omfattende annoteringen på genomisk, transkriptomisk og proteomisk nivå utvider bruksområdet langt utover farmakologi rettet mot ett enkelt mål, noe som gjør den til et allsidig verktøy i det moderne verktøysettet for kreftbiologi. Forskere som søker en validert, strengt kvalitetskontrollert NCI-H1781-stamme med bekreftet levedyktighet etter tining på over 97 %, kan bestille cellelinjen eller be om spesifikasjoner direkte på cytion.com.

Viktige publikasjoner

1. Phelps RM, Johnson BE, Ihde DC (1996) NCI-Navy Medical Oncology Branch cellelinjedatabase. Journal of cellular biochemistry. Supplement. PMID: 8806092
2. Barretina J, Caponigro G, Stransky N (2012) The Cancer Cell Line Encyclopedia muliggjør prediktiv modellering av følsomhet for kreftmedisiner. Nature. PMID: 22460905
3. Mulshine JL, Ujhazy P, Antman M (2020) Fra kliniske prøver til prekliniske modeller av kreft hos mennesker – en reise med NCI-cellelinjedatabasen – 25 år senere. Journal of cellular biochemistry. PMID: 31803961
4. Mitsudomi T, Steinberg SM, Nau MM (1992) p53-genmutasjoner i ikke-småcellede lungekreftcellelinjer og deres sammenheng med forekomsten av ras-mutasjoner og kliniske trekk. Oncogene. PMID: 1311061
5. Dutil J, Chen Z, Monteiro AN (2019) En interaktiv ressurs for å undersøke genetisk mangfold og estimert opphav i kreftcellelinjer. Cancer research. PMID: 30894373
6. Klijn C, Durinck S, Stawiski EW (2015) Et omfattende transkripsjonsbilde av humane kreftcellelinjer. Nature Biotechnology. PMID: 25485619
7. Li J, Zhao W, Akbani R (2017) Karakterisering av humane kreftcellelinjer ved hjelp av reversfase-proteinmatriser. Cancer Cell. PMID: 28196595
8. Ghandi M, Huang FW, Jané-Valbuena J (2019) Neste generasjons karakterisering av Cancer Cell Line Encyclopedia. Nature. PMID: 31068700
9. Rothenberg SM, Mohapatra G, Rivera MN (2010) En genomomfattende screening for mikrodelesjoner avslører forstyrrelser i polaritetskompleksgenene i ulike humane kreftformer. Cancer Research. PMID: 20215515
10. Yuan TL, Amzallag A, Bagni R (2018) Differensiert effektoraktivering av onkogent KRAS. Cell Reports. PMID: 29444439
11. Yu M, Selvaraj SK, Liang-Chu MM (2015) En ressurs for autentisering, annotering og kvalitetskontroll av cellelinjer. Nature. PMID: 25877200
12. Shimamura T, Ji H, Minami Y (2006) Ikke-småcellet lungekreft og Ba/F3-transformerte celler som bærer ERBB2 G776insV_G/C-mutasjonen, er følsomme for den dobbeltspesifikke epidermale vekstfaktorreseptor- og ERBB2-hemmeren HKI-272. Cancer Research. PMID: 16818618
13. Suzuki T, Fujii A, Ohya J (2009) Antitumoraktivitet hos den doble epidermale vekstfaktorreseptor- og ErbB2-kinasehemmeren MP-412 (AV-412) i xenotransplantasjonsmodeller hos mus. Cancer Science. PMID: 19459856
14. Koga T, Suda K, Nishino M (2021) Aktivitet og mekanisme for ervervet resistens mot tarloxotinib ved HER2-mutert lungekreft: en in vitro-studie. Translational lung cancer research. PMID: 34584864
15. Wang SE, Narasanna A, Perez-Torres M (2006) Mutasjon i HER2-kinasedomenet fører til konstitutiv fosforylering og aktivering av HER2 og EGFR samt resistens mot EGFR-tyrosinkinasehemmere. Cancer Cell. PMID: 16843263
16. Gadgeel SM, Ali S, Philip PA (2007) Responsen på dobbel blokkering av epidermal vekstfaktorreseptor (EGFR) og syklooxygenase-2 ved ikke-småcellet lungekreft kan være avhengig av tumorens EGFR-mutasjonsstatus. Cancer. PMID: 17948911
17. Cretella D, Saccani F, Quaini F (2014) Trastuzumab emtansine virker på HER-2-overekspresserende NSCLC-cellelinjer og overvinner gefitinib-resistens. Molecular Cancer. PMID: 24898067
18. Gonçalves E, Poulos RC, Cai Z (2022) Proteomisk kart over 949 humane cellelinjer for alle krefttyper. Cancer Cell. PMID: 35839778
19. Scholtalbers J, Boegel S, Bukur T (2015) TCLP: en nettbasert katalog over kreftcellelinjer som integrerer HLA-type, predikerte neoepitoper, virus og genuttrykk. Genome Medicine. PMID: 26589293
20. Byers LA, Wang J, Nilsson MB (2012) Proteomisk profilering identifiserer dysregulerte signalveier i småcellet lungekreft og nye terapeutiske mål, inkludert PARP1. Cancer Discovery. PMID: 22961666
21. Iorio F, Knijnenburg TA, Vis DJ (2016) Et overblikk over farmakogenomiske interaksjoner ved kreft. Cell. PMID: 27397505
22. McMillan EA, Ryu MJ, Diep CH (2018) «Chemistry-First»-tilnærming for valg av personlig tilpasset behandling ved lungekreft. Cell. PMID: 29681454
23. Modi S, Kubo A, Oie H (2000) Proteinekspresjon av den RB-relaterte genfamilien og SV40-stort T-antigen ved mesoteliom og lungekreft. Oncogene. PMID: 11030152
24. Robichaux JP, Elamin YY, Tan Z (2018) Mekanismer og klinisk aktivitet hos en EGFR- og HER2-ekson 20-selektiv kinasinhibitor ved ikke-småcellet lungekreft. Nature Medicine. PMID: 29686424