Tế bào Ramos - Nghiên cứu ung thư hạch tế bào B: Tầm quan trọng của tế bào Ramos

Tế bào Ramos là một dòng tế bào lympho B được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu y sinh. Đặc biệt, chúng được ứng dụng chủ yếu trong các nghiên cứu về miễn dịch học và ung thư. Các nhà nghiên cứu sử dụng các tế bào này để đánh giá các loại thuốc gây độc tế bào và nghiên cứu các kháng nguyên bề mặt tế bào B, các đột biến và cơ chế apoptosis.

Nguồn gốc và các đặc tính chung của tế bào Ramos

Việc hiểu rõ nguồn gốc và các đặc tính cơ bản của dòng tế bào đóng vai trò quan trọng trong việc quyết định tính phù hợp của nó đối với nghiên cứu của bạn. Do đó, bạn nên đánh giá kỹ lưỡng thông tin này trước khi bắt đầu bất kỳ công việc nào liên quan đến dòng tế bào này. Phần này bao gồm các câu hỏi thường gặp sau: Dòng tế bào ung thư Ramos là gì? Dòng tế bào Ramos CD19 là gì? Dòng tế bào Ramos CD20 là gì? Nguồn gốc của tế bào Ramos là gì? Các dấu hiệu trên dòng tế bào Ramos là gì? Kích thước tế bào Ramos là bao nhiêu? Hình thái của dòng tế bào Ramos như thế nào?

• Dòng tế bào Ramos được thiết lập vào năm 1972. Các tế bào này được phân lập từ dịch cổ trướng của một bé trai da trắng 3 tuổi mắc bệnh u lympho Burkitt kiểu Mỹ [1].
• Chúng biểu hiện các dấu hiệu tế bào B chính, bao gồm immunoglobulin M (IgM), CD19, CD20 và CD22.
• Các tế bào Ramos là tế bào âm tính với virus Epstein-Barr. Tuy nhiên, chúng có thể được chuyển đổi vĩnh viễn thành tế bào dương tính với virus Epstein-Barr.
• Các tế bào lymphoblast B này có hình dạng tròn.

Tế bào Ramos màu xanh so với tế bào Ramos B

Tế bào Ramos màu xanh và tế bào Ramos B đều là các tế bào u lympho Burkitt ở người. Cả hai đều âm tính với virus Epstein-Barr. Sự khác biệt giữa các tế bào này là tế bào Ramos màu xanh biểu hiện một gen báo cáo có thể được kích hoạt bởi NF-κB/AP-1 gọi là SEAP (enzyme phosphatase kiềm phôi tiết ra), trong khi tế bào Ramos màu trắng thì không.

Hình ảnh động 3D độ phân giải cao minh họa cơ chế hoạt động của tế bào lympho B.

Nuôi cấy tế bào Ramos

Phần này của bài viết nhằm giúp bạn tìm hiểu những thông tin cần thiết về nuôi cấy tế bào Ramos. Tại đây, bạn sẽ biết được: Thời gian nhân đôi của dòng tế bào là bao lâu? Môi trường nuôi cấy được khuyến nghị là gì? Làm thế nào để nuôi cấy tế bào Ramos?

Những điểm chính khi nuôi cấy tế bào Ramos

Thời gian nhân đôi:

Thời gian nhân đôi của tế bào Ramos là khoảng 20,4 ± 1,5 giờ. Tuy nhiên, con số này có thể thay đổi tùy thuộc vào điều kiện nuôi cấy tế bào được cung cấp.

Bám dính hay lơ lửng:

Các tế bào Ramos phát triển trong môi trường lơ lửng.

Mật độ tế bào:

Mật độ tế bào tối ưu cho dòng tế bào Ramos là 3 × 10^⁵ tế bào/ml. Để nuôi cấy lại, các tế bào lơ lửng được thu thập bằng cách ly tâm. Tế bào được thêm vào môi trường nuôi cấy mới và được tái phân tán cẩn thận. Sau đó, các tế bào được đổ vào bình mới với mật độ từ 3 đến 9 x 10^⁵ tế bào/ml.

Môi trường nuôi cấy:

RPMI 1640 bổ sung 10% huyết thanh bò thai, 2,1 mM Glutamine ổn định và 2,0 g/L NaHCO3 được sử dụng để nuôi cấy tế bào Ramos. Môi trường nuôi cấy nên được thay 2 lần mỗi tuần.

Điều kiện nuôi cấy:

Dòng tế bào u lympho Burkitt ở người (Ramos) được bảo quản trong tủ ấm có độ ẩm, nồng độ CO₂ 5% và nhiệt độ 37°C.

Bảo quản:

Các tế bào Ramos đông lạnh được bảo quản ở nhiệt độ dưới -150 độ C hoặc trong pha hơi của nitơ lỏng để bảo vệ khả năng sống của tế bào trong thời gian dài hơn.

Quy trình đông lạnh và môi trường:

Nên sử dụng môi trường đông lạnh CM-1 hoặc CM-ACF cho tế bào Ramos. Sử dụng quy trình đông lạnh chậm, cho phép nhiệt độ giảm dần 1 độ C mỗi phút. Quy trình đông lạnh chậm này giúp bảo vệ tế bào khỏi mọi cú sốc và tăng cường khả năng sống sót của chúng.

Quy trình rã đông:

Để rã đông, các tế bào đông lạnh được giữ trong bể nước đã được làm ấm trước ở 37°C trong 40 đến 60 giây cho đến khi chỉ còn lại một cục băng nhỏ. Sau đó, môi trường mới được thêm vào và các tế bào được ly tâm để loại bỏ các thành phần môi trường đông lạnh. Cặn được tái huyền phù và các tế bào được phân phối vào một bình mới chứa môi trường nuôi cấy.

Cấp độ an toàn sinh học:

Phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1 là điều cần thiết để duy trì các dòng tế bào Ramos âm tính với virus Epstein-Barr. Tuy nhiên, cấp độ an toàn sinh học sẽ được nâng lên cấp 2 khi các tế bào Ramos trở thành dương tính vĩnh viễn với virus Epstein-Barr.

Dòng tế bào lympho B Ramos đang sinh sôi trong môi trường lơ lửng, được quan sát dưới kính hiển vi với độ phóng đại 10x và 20x.

Ramos: Ưu điểm và hạn chế

Giống như các dòng tế bào khác, tế bào Ramos cũng có những ưu điểm và hạn chế riêng biệt. Phần này sẽ tìm hiểu một số điểm đáng chú ý có thể ảnh hưởng đáng kể đến việc sử dụng chúng trong nghiên cứu.

Ưu điểm

• Mô hình tế bào ung thư hạch Burkitt: Tế bào Ramos được phát triển từ một bệnh nhân ung thư hạch Burkitt, khiến chúng trở thành mô hình tế bào phù hợp để nghiên cứu các bệnh ác tính thuộc hệ bạch huyết.
• Dễ nuôi cấy: Tế bào Ramos dễ nuôi cấy và duy trì trong phòng thí nghiệm. Chúng có các yêu cầu và điều kiện nuôi cấy tế bào đơn giản.

Hạn chế

• Mô hình in vitro: Tế bào Ramos có thể không thể hiện hoàn toàn sự phức tạp về mặt di truyền của các khối u ở bệnh nhân, do đó hạn chế khả năng ứng dụng của chúng. Hơn nữa, kết quả từ các thí nghiệm sử dụng dòng tế bào Ramos có thể không phản ánh hoàn toàn các điều kiện in vivo, dẫn đến những thách thức trong việc chuyển giao kết quả nghiên cứu vào thực tiễn.

 Ứng dụng của tế bào Ramos trong nghiên cứu

Ramos mang lại những ứng dụng đầy hứa hẹn trong lĩnh vực y sinh. Một số ứng dụng nghiên cứu quan trọng của tế bào Ramos bao gồm:

• Sinh học ung thư hạch: Tế bào Ramos được sử dụng rộng rãi để nghiên cứu sinh học của ung thư hạch. Chúng được sử dụng để khám phá các yếu tố di truyền và phân tử cơ bản của các bệnh ác tính thuộc hệ bạch huyết. Bên cạnh đó, các nhà nghiên cứu thu được những hiểu biết sâu sắc về quá trình khởi phát, tiến triển và tính không đồng nhất của bệnh nhờ sử dụng các tế bào ung thư hạch Burkitt này. Các đột biến di truyền và các con đường truyền tín hiệu cũng được nghiên cứu, có khả năng dẫn đến việc phát triển các phương pháp chẩn đoán và điều trị chính xác hơn. Một nghiên cứu được thực hiện vào năm 2019 cho thấy rằng việc ức chế histone acetyltransferase GCN5 (General control non-depressible 5) làm giảm khả năng gây ung thư của các tế bào ung thư hạch Burkitt ở người (Ramos) thông qua việc phá vỡ tín hiệu BCR. Do đó, GCN5 được đề xuất là một mục tiêu khả thi để phát triển liệu pháp điều trị ung thư hạch [2].
• Sàng lọc và thử nghiệm thuốc: Dòng tế bào Ramos được sử dụng rộng rãi trong các mục đích sàng lọc và thử nghiệm thuốc. Các nhà nghiên cứu đánh giá hiệu quả của các hợp chất điều trị tiềm năng trong việc ức chế sự tăng sinh và phát triển của tế bào cũng như gây chết tế bào trong các tế bào u lympho. Điều này giúp xác định các ứng cử viên thuốc đầy hứa hẹn, từ đó thúc đẩy việc phát triển các phương pháp điều trị nhắm mục tiêu cho bệnh nhân u lympho. Chẳng hạn, một nghiên cứu đã chỉ ra rằng chiết xuất methanolic từ vỏ, cùi và hạt quả Annona có tác dụng vừa phải, trong khi chiết xuất chloroform lại có tác dụng mạnh mẽ đối với sự tăng sinh của các tế bào Ramos. Do đó, nghiên cứu này đề xuất rằng quả Annona có thể chứng minh hiệu quả trong việc phòng ngừa và điều trị ung thư hạch [3].

Tế bào Ramos phục vụ nghiên cứu của bạn

Các công trình nghiên cứu liên quan đến dòng tế bào Ramos

Phần này của bài viết liệt kê một số công trình nghiên cứu thú vị liên quan đến dòng tế bào Ramos:

Tín hiệu liên tục của CD79b và CD19 là điều kiện cần thiết cho khả năng thích nghi của các tế bào B trong u lympho Burkitt

Nghiên cứu này được công bố trên tạp chí The EMBO vào năm 2018. Nghiên cứu cho thấy các tế bào B Ramos cần biểu hiện các dấu hiệu CD19 và CD79b (thành phần tín hiệu BCR Igβ) để duy trì khả năng thích nghi và tăng trưởng cạnh tranh.

Các chất mô phỏng Smac và TRAIL phối hợp để gây ra quá trình necroptosis phụ thuộc vào MLKL trong các dòng tế bào u lympho Burkitt

Nghiên cứu này được công bố trên tạp chí Neoplasia (2021) đã sử dụng các tế bào Ramos và đề xuất rằng miền kinase dòng hỗn hợp (MLKL) được điều chỉnh theo biểu sinh trong các tế bào ung thư hạch Burkitt (Ramos). Do đó, đây là một dấu hiệu tiên lượng đầy hứa hẹn cho sự thành công của các liệu pháp liên quan đến quá trình chết tế bào theo chương trình.

Sự phosphoryl hóa PBK/TOPK Tyr74 bởi JAK2 thúc đẩy sự phát triển khối u ung thư hạch Burkitt

Bài báo nghiên cứu trên tạp chí Cancer Letters (2022) này cho thấy trục tín hiệu JAK2/TOPK/histone H3 đóng vai trò quan trọng trong sự tăng sinh của các dòng tế bào ung thư hạch B trong ống nghiệm.

Căng thẳng ER do Verotoxin-1 gây ra kích hoạt các con đường apoptosis hoặc sinh tồn trong tế bào u lympho Burkitt

Bài báo này được công bố năm 2020 trên tạp chí Toxins. Nghiên cứu đề xuất rằng việc điều trị bằng verotoxin-1 gây ra căng thẳng lưới nội chất (ER) trong các tế bào B Ramos. Điều này dẫn đến việc khởi động các tín hiệu chết tế bào hoặc sống sót trong các dòng tế bào ung thư hạch.

Silymarin ức chế biểu hiện gen thụ thể Toll-like 8 và quá trình apoptosis trong dòng tế bào ung thư Ramos

Nghiên cứu này trên tạp chí Avicenna Journal of Phytomedicine (2020) báo cáo rằng một hợp chất tự nhiên, silymarin, ức chế biểu hiện TLR8 (thụ thể Toll-like 8) và quá trình apoptosis trong dòng tế bào Ramos.

Tài nguyên về dòng tế bào Ramos: Quy trình, video và hơn thế nữa

Dưới đây là một số tài nguyên trực tuyến về tế bào Ramos:

• Truyền gen vào tế bào Ramos: Tài liệu này sẽ giúp bạn tìm hiểu quy trình truyền gen vào dòng tế bào Ramos.

Liên kết sau đây chứa quy trình nuôi cấy tế bào Ramos:

• Tế bào Ramos: Trang web này cung cấp thông tin cơ bản về dòng tế bào Ramos. Ngoài ra, trang web còn có quy trình nuôi cấy lại tế bào Ramos cũng như hướng dẫn xử lý các mẫu nuôi cấy đang phân chia và mẫu đông lạnh. Bên cạnh đó, thông tin về môi trường nuôi cấy, thời gian nhân đôi và mật độ tế bào Ramos cũng được cung cấp.

Những thông tin quan trọng về tế bào Ramos: Câu hỏi thường gặp

Tài liệu tham khảo

1. Kerntke, C.G., Phân tích cấu trúc và khả năng truyền tín hiệu của IgE màng trong quá trình tương tác với CD19 và CD23 ở tế bào lympho B. 2021, Đại học Georg-August, Göttingen.
2. Farria, A.T., et al., Ức chế GCN5 HAT làm giảm sự sống sót của tế bào u lympho Burkitt ở người thông qua việc giảm biểu hiện gen mục tiêu MYC và cản trở các con đường truyền tín hiệu BCR. Oncotarget, 2019. 10(56): tr. 5847.
3. Al‐Shaya, H.M., và cộng sự, Thành phần hóa thực vật và hoạt tính chống oxy hóa của quả annona cùng tác động của nó đối với sự tăng sinh của tế bào u lympho. Food Science & Nutrition, 2020. 8(1): tr. 58-68.