Sel Ramos - Penelitian Limfoma Sel B: Pentingnya Sel Ramos

Sel Ramos adalah garis sel limfosit B yang banyak digunakan dalam penelitian biomedis. Secara khusus, sel ini banyak digunakan dalam studi imunologi dan kanker. Para peneliti memanfaatkan sel ini untuk mengevaluasi obat sitotoksik serta mempelajari antigen permukaan sel B, mutasi, dan mekanisme apoptosis.

Asal dan karakteristik umum sel Ramos

Memahami asal-usul dan karakteristik utama suatu garis sel sangat penting dalam menentukan kesesuaiannya untuk penelitian Anda. Oleh karena itu, disarankan untuk mengevaluasi informasi ini secara menyeluruh sebelum memulai penelitian apa pun menggunakan garis sel tersebut. Bagian ini membahas pertanyaan-pertanyaan yang sering diajukan berikut: Apa itu garis sel kanker Ramos? Apa itu garis sel Ramos CD19? Apa itu garis sel Ramos CD20? Dari mana asal sel Ramos? Apa saja penanda pada garis sel Ramos? Berapa ukuran sel Ramos? Bagaimana morfologi garis sel Ramos?

• Lini sel Ramos didirikan pada tahun 1972. Sel-sel ini berasal dari cairan asites seorang anak laki-laki Kaukasia berusia 3 tahun yang menderita limfoma Burkitt tipe Amerika [1].
• Sel-sel ini mengekspresikan penanda sel B utama, termasuk imunoglobulin M (IgM), CD19, CD20, dan CD22.
• Sel Ramos adalah sel yang negatif terhadap virus Epstein-Barr. Namun, sel-sel ini dapat diubah secara permanen menjadi sel yang positif terhadap virus Epstein-Barr.
• Sel-sel limfoblas B ini memiliki morfologi berbentuk bulat.

Sel biru Ramos vs. sel B Ramos

Sel biru Ramos dan sel B Ramos sama-sama merupakan sel limfoma Burkitt manusia. Keduanya negatif terhadap virus Epstein-Barr. Perbedaan antara kedua sel ini adalah bahwa sel biru Ramos mengekspresikan gen reporter yang dapat diinduksi oleh NF-κB/AP-1 yang disebut SEAP (secreted embryonic alkaline phosphate), sedangkan sel Ramos putih tidak.

Animasi 3D beresolusi tinggi yang menggambarkan dinamika sel limfosit B.

Pemeliharaan Sel Ramos

Bagian artikel ini didedikasikan untuk membantu Anda mempelajari informasi penting mengenai kultur sel Ramos. Di sini, Anda akan mengetahui: Berapa waktu penggandaan garis sel tersebut? Apa media yang direkomendasikan? Bagaimana cara membiakkan sel Ramos?

Poin-Poin Penting dalam Pembiakan Sel Ramos

Waktu Penggandaan:

Waktu penggandaan sel Ramos kira-kira 20,4 ± 1,5 jam. Namun, waktu ini dapat bervariasi tergantung pada kondisi kultur sel yang diberikan.

Adherent atau dalam Suspensi:

Sel Ramos tumbuh dalam suspensi.

Kepadatan sel:

Kepadatan sel optimal untuk garis sel Ramos adalah 3 x 10^⁵ sel/ml. Untuk subkultur, sel-sel yang berada dalam suspensi dikumpulkan melalui sentrifugasi. Sel-sel tersebut ditambahkan dengan media segar dan disuspensi kembali dengan hati-hati. Setelah itu, sel-sel tersebut dituangkan ke dalam labu baru dengan kepadatan 3 hingga 9 x 10^⁵ sel/ml.

Media Pertumbuhan:

RPMI 1640 yang ditambah dengan 10% serum janin sapi, 2,1 mM glutamin stabil, dan 2,0 g/L NaHCO₃ digunakan untuk membiakkan sel Ramos. Media harus diganti 2 kali seminggu.

Kondisi Pertumbuhan:

Garis sel limfoma Burkitt manusia (Ramos) disimpan dalam inkubator yang dilembabkan pada konsentrasi CO₂ 5% dan suhu 37°C.

Penyimpanan:

Sel Ramos yang dibekukan disimpan pada suhu di bawah -150 derajat Celcius atau dalam fase uap nitrogen cair untuk menjaga kelangsungan hidup sel dalam jangka waktu yang lebih lama.

Proses Pembekuan dan Media:

Media pembekuan CM-1 atau CM-ACF direkomendasikan untuk sel Ramos. Proses pembekuan lambat digunakan, yang memungkinkan penurunan suhu secara bertahap sebesar 1 derajat Celsius per menit. Pembekuan lambat ini melindungi sel dari guncangan dan meningkatkan viabilitasnya.

Proses Pencairan:

Untuk pencairan, sel beku disimpan dalam bak air yang telah dipanaskan sebelumnya pada suhu 37°C selama 40 hingga 60 detik hingga hanya tersisa gumpalan es kecil. Setelah itu, media segar ditambahkan dan sel-sel disentrifugasi untuk menghilangkan unsur-unsur media pembekuan. Pelet tersebut disuspensi kembali dan sel-sel dimasukkan ke dalam labu baru yang berisi media kultur.

Tingkat Keamanan Biologis:

Laboratorium dengan tingkat keamanan biologis 1 sangat penting untuk memelihara kultur sel Ramos yang negatif terhadap virus Epstein-Barr. Namun, tingkat keamanan biologis dinaikkan menjadi 2 ketika sel Ramos secara permanen berubah menjadi positif terhadap virus Epstein-Barr.

Baris sel limfosit B Ramos yang sedang berkembang biak dalam suspensi, ditampilkan pada perbesaran 10x dan 20x.

Ramos: Keunggulan & Keterbatasan

Seperti garis sel lainnya, sel Ramos juga memiliki kelebihan dan keterbatasan yang khas. Bagian ini akan membahas beberapa di antaranya yang menonjol dan dapat secara signifikan memengaruhi penggunaannya dalam penelitian.

Keunggulan

• Model sel limfoma Burkitt: Sel Ramos dikembangkan dari pasien limfoma Burkitt, sehingga menjadikannya model sel yang relevan untuk mempelajari keganasan limfoid.
• Mudah Dikultur: Sel Ramos mudah dikultur dan dipelihara di laboratorium. Sel ini memiliki persyaratan dan kondisi kultur sel yang sederhana.

Keterbatasan

• Model in vitro: Sel Ramos mungkin tidak sepenuhnya mewakili kompleksitas genetik tumor pasien, sehingga membatasi penerapannya. Selain itu, hasil eksperimen yang menggunakan garis sel Ramos mungkin tidak sepenuhnya mencerminkan kondisi in vivo, yang berpotensi menimbulkan tantangan translasi.

 Aplikasi sel Ramos dalam penelitian

Sel Ramos menawarkan aplikasi yang menjanjikan di bidang biomedis. Beberapa penggunaan penelitian penting dari sel Ramos meliputi:

• Biologi Limfoma: Sel Ramos secara luas digunakan untuk mempelajari biologi limfoma. Sel-sel ini digunakan untuk mengeksplorasi faktor genetik dan molekuler yang mendasari keganasan limfoid. Selain itu, para peneliti memperoleh wawasan mengenai awal mula, perkembangan, dan heterogenitas penyakit dengan memanfaatkan sel-sel limfoma Burkitt ini. Mutasi genetik dan jalur pensinyalan juga diteliti, yang berpotensi mengarah pada pengembangan pendekatan diagnostik dan terapeutik yang lebih tepat. Sebuah studi yang dilakukan pada tahun 2019 menemukan bahwa penghambatan histon asetiltransferase GCN5 (General control non-depressible 5) menurunkan tumorigenisitas sel limfoma Burkitt manusia (Ramos) melalui gangguan sinyal BCR. Oleh karena itu, GCN5 diusulkan sebagai target yang layak untuk pengembangan terapi obat limfoma [2].
• Penyaringan dan pengujian obat: Garis sel Ramos banyak digunakan untuk tujuan penyaringan dan pengujian obat. Para peneliti mengevaluasi kemanjuran senyawa terapeutik potensial dalam menghambat proliferasi dan pertumbuhan sel serta memicu kematian sel pada sel limfoma. Hal ini membantu mengidentifikasi kandidat obat yang menjanjikan, sehingga memfasilitasi pengembangan pengobatan yang ditargetkan bagi pasien limfoma. Misalnya, penelitian menunjukkan bahwa ekstrak metanol dari kulit, daging buah, dan biji buah Annona memberikan efek sedang, sedangkan ekstrak kloroform menunjukkan efek yang kuat terhadap proliferasi sel Ramos. Dengan demikian, penelitian tersebut mengusulkan bahwa buah Annona mungkin terbukti efektif dalam pencegahan dan pengobatan limfoma [3].

Sel Ramos untuk Penelitian Anda

Publikasi yang menampilkan sel Ramos

Bagian artikel ini mencantumkan beberapa publikasi penelitian menarik yang menampilkan garis sel Ramos:

Sinyal berkelanjutan dari CD79b dan CD19 diperlukan untuk kelangsungan hidup sel B limfoma Burkitt

Penelitian ini diterbitkan dalam jurnal The EMBO pada tahun 2018. Studi tersebut menemukan bahwa sel B Ramos memerlukan ekspresi penanda CD19 dan CD79b (komponen sinyal BCR Igβ) pada sel Ramos untuk kelangsungan hidup dan pertumbuhan kompetitifnya.

Mimetik Smac dan TRAIL bekerja sama untuk menginduksi nekroptosis yang bergantung pada MLKL pada garis sel limfoma Burkitt

Penelitian yang diterbitkan dalam jurnal *Neoplasia* (2021) ini menggunakan sel Ramos dan mengusulkan bahwa domain kinase garis keturunan campuran (MLKL) diatur secara epigenetik pada sel limfoma Burkitt (Ramos). Oleh karena itu, MLKL merupakan penanda prognostik yang menjanjikan untuk keberhasilan pengobatan dengan terapi yang berkaitan dengan nekroptosis.

Fosforilasi PBK/TOPK Tyr74 oleh JAK2 mendorong pertumbuhan tumor limfoma Burkitt

Artikel penelitian dalam jurnal *Cancer Letters* (2022) ini menyarankan bahwa sumbu sinyal JAK2/TOPK/histon H3 memainkan peran krusial dalam proliferasi garis sel limfoma B secara in vitro.

Stres ER yang Diinduksi Verotoksin-1 Memicu Jalur Apoptosis atau Kelangsungan Hidup pada Sel Limfoma Burkitt

Artikel ini diterbitkan pada tahun 2020 di jurnal Toxins. Studi ini mengusulkan bahwa perlakuan dengan verotoxin-1 memicu stres retikulum endoplasma (ER) pada sel B Ramos. Hal ini memicu dimulainya jalur sinyal apoptosis atau kelangsungan hidup pada garis sel limfoma.

Silymarin menghambat ekspresi gen reseptor Toll-like 8 dan apoptosis pada garis sel kanker Ramos

Penelitian dalam jurnal *Avicenna Journal of Phytomedicine* (2020) ini melaporkan bahwa senyawa alami, silymarin, menekan ekspresi TLR8 (reseptor Toll-like 8) dan apoptosis pada garis sel Ramos.

Sumber Daya untuk garis sel Ramos: Protokol, Video, dan Lainnya

Berikut ini adalah beberapa sumber daya daring mengenai sel Ramos:

• Transfeksi sel Ramos: Dokumen ini akan membantu Anda mempelajari protokol transfeksi pada garis sel Ramos.

Tautan berikut berisi protokol kultur sel Ramos:

• Sel Ramos: Situs web ini berisi informasi dasar mengenai garis sel Ramos. Situs ini juga memuat protokol untuk subkultur sel Ramos serta penanganan kultur yang sedang berkembang biak dan yang telah diawetkan secara kriogenik. Selain itu, informasi mengenai media sel Ramos, waktu penggandaan, dan kepadatan sel juga tersedia.

Wawasan Utama tentang Ramos Cells: Pertanyaan yang Sering Diajukan

Daftar Pustaka

1. Kerntke, C.G., Analisis organisasi dan kapasitas pensinyalan IgE membran selama interaksinya dengan CD19 dan CD23 pada limfosit B. 2021, Georg-August-Universität Göttingen.
2. Farria, A.T., dkk., Penghambatan GCN5 HAT mengurangi kelangsungan hidup sel limfoma Burkitt manusia melalui pengurangan ekspresi gen target MYC dan penghambatan jalur pensinyalan BCR. Oncotarget, 2019. 10(56): hlm. 5847.
3. Al‐Shaya, H.M., dkk., Profil fitokimia dan aktivitas antioksidan buah annona serta pengaruhnya terhadap proliferasi sel limfoma. Food Science & Nutrition, 2020. 8(1): hlm. 58-68.