เซลล์รามอส - การวิจัยมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดบีเซลล์: ความสำคัญของเซลล์รามอส

เซลล์รามอสเป็นเซลล์ไลน์ของลิมโฟไซต์บีที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีวการแพทย์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งมีการนำไปใช้ในงานวิจัยด้านภูมิคุ้มกันวิทยาและมะเร็งวิทยา นักวิจัยใช้เซลล์เหล่านี้ในการประเมินยาต้านมะเร็งและศึกษาแอนติเจนบนผิวเซลล์บี การกลายพันธุ์ และกลไกการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส

ที่มาและลักษณะทั่วไปของเซลล์รามอส

การเข้าใจถึงต้นกำเนิดและคุณสมบัติที่สำคัญของสายเซลล์มีบทบาทสำคัญอย่างยิ่งในการตัดสินใจว่าสายเซลล์นั้นเหมาะสมกับการวิจัยของคุณหรือไม่ ดังนั้น จึงแนะนำให้ประเมินข้อมูลนี้อย่างละเอียดก่อนเริ่มทำงานใด ๆ กับสายเซลล์นั้น ๆ หัวข้อนี้จะครอบคลุมคำถามที่พบบ่อยต่อไปนี้: สายเซลล์มะเร็ง Ramos คืออะไร? อะไรคือเซลล์ไลน์ Ramos CD19? อะไรคือเซลล์ไลน์ Ramos CD20? อะไรคือที่มาของเซลล์ Ramos? อะไรคือตัวบ่งชี้บนเซลล์ไลน์ Ramos? ขนาดของเซลล์ Ramos คืออะไร? ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์ไลน์ Ramos คืออะไร?

• เซลล์ไลน์ Ramos ถูกก่อตั้งขึ้นในปี 1972 เซลล์เหล่านี้ได้มาจากน้ำในช่องท้องของเด็กชายชาวคอเคเชียนอายุ 3 ปีที่เป็นมะเร็งต่อมน้ำเหลือง Burkitt ชนิดอเมริกัน [1]
• พวกเขาแสดงตัวบ่งชี้สำคัญของเซลล์บี รวมถึงอิมมูโนโกลบูลินเอ็ม (IgM), CD19, CD20, และ CD22.
• เซลล์รามอสเป็นเซลล์ที่ไม่พบเชื้อไวรัสเอปสไตน์-บาร์ อย่างไรก็ตาม เซลล์เหล่านี้สามารถเปลี่ยนแปลงไปเป็นเซลล์ที่พบเชื้อไวรัสเอปสไตน์-บาร์ได้อย่างถาวร
• เซลล์ลิมโฟบลาสต์ชนิดบีเหล่านี้มีลักษณะรูปร่างเป็นทรงกลม

เซลล์รามอสสีน้ำเงินเทียบกับเซลล์รามอส B

เซลล์ Ramos blue และเซลล์ Ramos B เป็นเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลือง Burkitt ของมนุษย์ทั้งคู่ ทั้งสองชนิดไม่พบเชื้อไวรัสเอปสไตน์-บาร์ร ความแตกต่างระหว่างเซลล์เหล่านี้คือ เซลล์ Ramos blue แสดงออกของยีนรีพอร์ตเตอร์ที่เหนี่ยวนำโดย NF-κB/AP-1 ที่เรียกว่า SEAP (secreted embryonic alkaline phosphate) ในขณะที่เซลล์ Ramos สีขาวไม่แสดงออก

แอนิเมชัน 3 มิติความละเอียดสูงที่แสดงพลวัตของเซลล์บีลิมโฟไซต์

การเพาะเลี้ยงเซลล์ Ramos

ส่วนนี้ของบทความนี้ถูกจัดเตรียมไว้เพื่อช่วยคุณเรียนรู้ข้อมูลเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ Ramos ในลักษณะคำสั่ง ที่นี่คุณจะได้ทราบถึง: เวลาการเพิ่มจำนวนของเซลล์ไลน์คืออะไร? สารอาหารที่แนะนำคืออะไร? วิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์ Ramos คืออะไร?

จุดสำคัญในการเพาะเลี้ยงเซลล์ Ramos

เวลาสองเท่า:

เวลาการเพิ่มจำนวนของเซลล์ Ramos ประมาณ 20.4 ± 1.5 ชั่วโมง อย่างไรก็ตาม อาจมีการเปลี่ยนแปลงขึ้นอยู่กับเงื่อนไขการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่ให้ไว้

ติดกันหรือแขวนลอย:

เซลล์รามอสเจริญเติบโตในสภาพแขวนลอย

ความหนาแน่นของเซลล์:

ความหนาแน่นของเซลล์ที่เหมาะสมสำหรับสายพันธุ์ Ramos คือ 3 x 10⁵ เซลล์/มล. สำหรับการเพาะเลี้ยงซ้ำ เซลล์ที่แขวนลอยจะถูกเก็บรวบรวมผ่านการปั่นเหวี่ยง จากนั้นเติมเซลล์ด้วยอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่และแขวนลอยอย่างระมัดระวัง หลังจากนั้น เซลล์ถูกเทลงในขวดใหม่ด้วยความหนาแน่น 3 ถึง 9 x 10⁵ เซลล์/มิลลิลิตร

อาหารเลี้ยงเชื้อ:

RPMI 1640 ที่เสริมด้วยเซรั่มจากเลือดวัวในครรภ์ 10%, กลูตามีนเสถียร 2.1 มิลลิโมลาร์ และโซเดียมไฮโดรเจนคาร์บอเนต 2.0 กรัมต่อลิตร ใช้สำหรับเพาะเลี้ยงเซลล์ Ramos สื่อควรเปลี่ยนสัปดาห์ละ 2 ครั้ง

เงื่อนไขการเจริญเติบโต:

เซลล์ไลน์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองเบอร์คิตต์ของมนุษย์ (Ramos) ถูกเก็บรักษาไว้ในตู้บ่มที่มีอากาศชื้นที่อุณหภูมิ 5% CO2 และ 37°C

การเก็บรักษา:

เซลล์ Ramos ที่ถูกแช่แข็งจะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150 องศาเซลเซียส หรือในสถานะไอของไนโตรเจนเหลว เพื่อรักษาความมีชีวิตของเซลล์ให้คงอยู่ได้นานยิ่งขึ้น

กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง:

แนะนำให้ใช้สื่อแช่แข็ง CM-1 หรือ CM-ACF สำหรับเซลล์ Ramos กระบวนการแช่แข็งช้าที่ใช้จะอนุญาตให้ลดอุณหภูมิลงทีละ 1 องศาเซลเซียสต่อนาที การแช่แข็งช้านี้จะช่วยป้องกันเซลล์จากการช็อกและเพิ่มความสามารถในการมีชีวิตของเซลล์

กระบวนการละลาย

สำหรับการละลายเซลล์แช่แข็ง ให้เก็บเซลล์ไว้ในอ่างน้ำอุ่นที่เตรียมไว้ล่วงหน้าที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 40 ถึง 60 วินาที จนกระทั่งเหลือเพียงก้อนน้ำแข็งขนาดเล็ก หลังจากนั้น จะเติมอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่และทำการปั่นเหวี่ยงเพื่อกำจัดองค์ประกอบของอาหารแช่แข็งออก จากนั้นนำตะกอนแขวนลอยมาแขวนลอยอีกครั้งและแบ่งเซลล์ลงในขวดเลี้ยงเชื้อใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อ

ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ:

ห้องปฏิบัติการความปลอดภัยทางชีวภาพระดับ 1 มีความสำคัญอย่างยิ่งสำหรับการรักษาวัฒนธรรมเซลล์ Ramos ที่ปลอดเชื้อไวรัส Epstein-Barr อย่างไรก็ตาม ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพจะถูกปรับเป็นระดับ 2 เมื่อเซลล์ Ramos ถูกเปลี่ยนเป็นเชื้อไวรัส Epstein-Barr อย่างถาวร

เซลล์ไลน์ Ramos ที่กำลังเพิ่มจำนวนของเซลล์ลิมโฟไซต์ B ในสภาพแขวนลอย แสดงที่การขยาย 10 เท่า และ 20 เท่า

Ramos: ข้อดีและข้อจำกัด

เช่นเดียวกับเซลล์ไลน์อื่น ๆ เซลล์ Ramos ก็มีข้อได้เปรียบและข้อจำกัดที่ชัดเจนเช่นกัน ส่วนนี้จะสำรวจข้อสังเกตบางประการที่อาจมีอิทธิพลอย่างมากต่อการใช้งานในการวิจัย

ข้อดี

• แบบจำลองเซลล์ Burkitt lymphoma: เซลล์ Ramos ถูกพัฒนาจากผู้ป่วย Burkitt's lymphoma ทำให้เป็นแบบจำลองเซลล์ที่เกี่ยวข้องสำหรับการศึกษาโรคมะเร็งต่อมน้ำเหลือง
• การเพาะเลี้ยงที่ง่าย: เซลล์ Ramos สามารถเพาะเลี้ยงและดูแลในห้องปฏิบัติการได้อย่างง่ายดาย มีข้อกำหนดและเงื่อนไขในการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่ไม่ซับซ้อน

ข้อจำกัด

• แบบจำลองในหลอดทดลอง: เซลล์ Ramos อาจไม่สามารถแสดงถึงความซับซ้อนทางพันธุกรรมของเนื้องอกในผู้ป่วยได้อย่างสมบูรณ์ จึงจำกัดการนำไปใช้ นอกจากนี้ ผลลัพธ์จากการทดลองที่ใช้สายพันธุ์เซลล์ Ramos อาจไม่สะท้อนสภาพในร่างกายจริงทั้งหมด ซึ่งอาจนำไปสู่ความท้าทายในการแปลผลสู่การประยุกต์ใช้ในทางคลินิก

 การประยุกต์ใช้เซลล์รามอสในงานวิจัย

Ramos มีศักยภาพในการประยุกต์ใช้ที่น่าสนใจในสาขาชีวการแพทย์ การใช้งานวิจัยที่สำคัญของเซลล์ Ramos ได้แก่:

• ชีววิทยาของมะเร็งต่อมน้ำเหลือง: เซลล์ Ramos ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งต่อมน้ำเหลือง โดยใช้เพื่อสำรวจปัจจัยทางพันธุกรรมและระดับโมเลกุลที่เป็นรากฐานของมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดต่าง ๆ นอกจากนี้ นักวิจัยยังได้รับข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับการเริ่มต้น การพัฒนา และความหลากหลายของโรค โดยใช้เซลล์ Burkitt lymphoma เหล่านี้ การกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมและเส้นทางการส่งสัญญาณยังได้รับการศึกษา ซึ่งอาจนำไปสู่การพัฒนาวิธีการวินิจฉัยและการรักษาที่แม่นยำยิ่งขึ้น การศึกษาที่ดำเนินการในปี 2019 พบว่าการยับยั้งเอนไซม์ GCN5 (General control non-depressible 5) Histone acetyltransferase ช่วยลดความสามารถในการก่อเนื้องอกของเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลือง Burkitt ของมนุษย์ (Ramos) ผ่านการรบกวนสัญญาณ BCR ดังนั้น GCN5 จึงถูกเสนอให้เป็นเป้าหมายที่เป็นไปได้สำหรับการพัฒนายารักษาโรคมะเร็งต่อมน้ำเหลือง [2]
• การคัดกรองและทดสอบยา: สายเซลล์ Ramos ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในวัตถุประสงค์การคัดกรองและทดสอบยา นักวิจัยประเมินประสิทธิภาพของสารประกอบที่มีศักยภาพในการรักษาในการยับยั้งการเพิ่มจำนวนและการเจริญเติบโตของเซลล์ และกระตุ้นการตายของเซลล์ในเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลือง ซึ่งช่วยในการระบุตัวยาที่มีแนวโน้มดี จึงช่วยอำนวยความสะดวกในการพัฒนาการรักษาที่ตรงเป้าหมายสำหรับผู้ป่วยโรคมะเร็งต่อมน้ำเหลือง งานวิจัยแสดงให้เห็นว่าสารสกัดเมทานอลจากเปลือก เนื้อ และเมล็ดของผลอะโพนามีฤทธิ์ปานกลาง ในขณะที่สารสกัดคลอโรฟอร์มมีฤทธิ์แรงต่อการเพิ่มจำนวนของเซลล์ Ramos ดังนั้น การศึกษานี้จึงเสนอว่าผลอะโพนาน่าจะมีประสิทธิภาพในการป้องกันและรักษาโรคมะเร็งต่อมน้ำเหลือง [3]

เซลล์รามอสสำหรับการวิจัยของคุณ

สิ่งพิมพ์ที่มีเซลล์ Ramos

ส่วนนี้ของบทความได้รวบรวมผลงานวิจัยที่น่าสนใจบางฉบับซึ่งนำเสนอข้อมูลเกี่ยวกับสายพันธุ์ Ramos cell line:

การส่งสัญญาณอย่างต่อเนื่องของ CD 79b และ CD 19 จำเป็นสำหรับความสมบูรณ์ของเซลล์ B ของ Burkitt lymphoma

งานวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร The EMBO journal ในปี 2018 การศึกษาพบว่าเซลล์ Ramos B ต้องการการแสดงออกของ Ramos cells CD19 และ CD79b (ส่วนประกอบของสัญญาณ BCR Igβ) เป็นเครื่องหมายสำหรับความสมบูรณ์และการเจริญเติบโตในการแข่งขันของพวกมัน

สารเลียนแบบ Smac และ TRAIL ร่วมกันกระตุ้นให้เกิดกระบวนการเนโครพอซิสที่ขึ้นกับ MLKL ในเซลล์ไลน์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิด Burkit

การศึกษาที่ตีพิมพ์ในวารสาร Neoplasia (2021) นี้ได้ใช้เซลล์ Ramos และเสนอว่าโดเมนไคเนสสายพันธุ์ผสม (MLKL) ถูกควบคุมโดยกลไกอีพิเจเนติกในเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลือง Burkitt (Ramos) ดังนั้น จึงถือเป็นเครื่องหมายพยากรณ์ที่มีแนวโน้มดีสำหรับความสำเร็จในการรักษาด้วยวิธีที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการเนโครพอทอซิส

การฟอสโฟริเลชันของ PBK/TOPK Tyr74 โดย JAK2 ส่งเสริมการเจริญเติบโตของเนื้องอก Burkitt lymphoma

บทความวิจัยใน Cancer Letters (2022) ชี้ให้เห็นว่าแกนสัญญาณ JAK2/TOPK/histone H3 มีบทบาทสำคัญในการเพิ่มจำนวนของเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิด B ในหลอดทดลอง

ความเครียดในเอนโดพลาสมิกเรติคูลัมที่เกิดจาก Verotoxin-1 กระตุ้นเส้นทาง apoptosis หรือการอยู่รอดในเซลล์ Burkitt Lymphoma

บทความนี้ได้รับการตีพิมพ์ในปี 2020 ในวารสาร Toxins การศึกษานี้เสนอว่าการรักษาด้วยเวโรท็อกซิน-1 ก่อให้เกิดความเครียดในเอนโดพลาสมิกเรติคูลัม (ER) ในเซลล์ Ramos B ซึ่งนำไปสู่การเริ่มต้นของสัญญาณการตายแบบอะพอพโทซิสหรือการอยู่รอดในเซลล์ไลน์ของมะเร็งต่อมน้ำเหลือง

ซิลิมารินยับยั้งการแสดงออกของยีนตัวรับ Toll-like receptor 8 และการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสในเซลล์มะเร็งสายพันธุ์ Ramos

การศึกษาในวารสาร Avicenna Journal of Phytomedicine (2020) รายงานว่าสารประกอบธรรมชาติซิลิมารินสามารถยับยั้งการแสดงออกของ TLR8 (ตัวรับชนิด Toll-like receptor 8) และการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสในเซลล์ไลน์ Ramos

ทรัพยากรสำหรับสายพันธุ์ Ramos: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ

ต่อไปนี้คือแหล่งข้อมูลออนไลน์เกี่ยวกับเซลล์ Ramos:

• การถ่ายยีนในเซลล์ Ramos: เอกสารนี้จะช่วยให้คุณเรียนรู้ขั้นตอนวิธีการสำหรับการถ่ายยีนในสายพันธุ์เซลล์ Ramos

ลิงก์ต่อไปนี้ประกอบด้วยโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ Ramos:

• เซลล์ Ramos: เว็บไซต์นี้มีข้อมูลพื้นฐานเกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์ Ramos นอกจากนี้ยังมีโปรโตคอลสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ Ramos การจัดการเซลล์ที่เพิ่มจำนวนและการเก็บรักษาเซลล์ในสภาวะแช่แข็ง อีกทั้งยังมีข้อมูลเกี่ยวกับอาหารเลี้ยงเซลล์ Ramos, เวลาที่ใช้ในการเพิ่มจำนวนเซลล์ และความหนาแน่นของเซลล์

ข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับเซลล์รามอส: คำถามที่พบบ่อย

เอกสารอ้างอิง

1. Kerntke, C.G., การวิเคราะห์การจัดระเบียบและความสามารถในการส่งสัญญาณของ IgE บนเยื่อหุ้มเซลล์ในระหว่างปฏิสัมพันธ์กับ CD19 และ CD23 ในเซลล์ลิมโฟไซต์บี. 2021, Georg-August-Universität Göttingen.
2. Farria, A.T., et al., การยับยั้ง GCN5 HAT ลดการอยู่รอดของเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลือง Burkitt ในมนุษย์ผ่านการลดการแสดงออกของยีนเป้าหมาย MYC และขัดขวางเส้นทางการส่งสัญญาณ BCR. Oncotarget, 2019. 10(56): p. 5847.
3. อัล-ชะยา, เอช.เอ็ม., และคณะ, โปรไฟล์สารพฤกษเคมีและกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระของผลอะโพน่าและผลต่อการเพิ่มจำนวนของเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลือง. วิทยาศาสตร์อาหารและโภชนาการ, 2020. 8(1): หน้า 58-68.