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- Tissu
- Poumon
- Maladie
- Carcinome pulmonaire à petites cellules
- Site métastatique
- Effusion pleurale
- Synonymes
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Documents
NCI-H446
Cell line · Référence du produit 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Personnalisation / Recommandations
- NCI-H446Cell line€430.00
Recommandé (lot le plus récent)
01Informations générales
- Description
- Cette lignée cellulaire a été créée en 1982 par D. Carney, A.F. Gazdar et ses collaborateurs à partir du liquide pleural d'un patient atteint d'un cancer du poumon à petites cellules. La morphologie initiale de la tumeur n'était pas caractéristique d'un cancer du poumon à petites cellules. La lignée cellulaire est une variante du cancer du poumon à petites cellules en termes de biochimie et de morphologie, et exprime l'énolase spécifique des neurones ainsi que l'isoenzyme cérébrale de la créatine kinase. Aucune L-DOPA décarboxylase, bombésine, vasopressine, ocytocine ou peptide libérateur de gastrine n'a été détectée dans la lignée cellulaire. Cette lignée cellulaire présente un degré d'amplification de l'ADN c-myc 20 fois plus élevé et un degré d'ARN c-myc 15 fois plus élevé. La lignée cellulaire a été initialement multipliée dans un milieu RPMI 1640 sans sérum, supplémenté avec 10 nM d'hydrocortisone, 5 microgrammes/mL d'insuline, 10 microgrammes/mL de transferrine, 10 nM de 17-bêta-estradiol, et 30 nM de sélénite de sodium. Les cellules peuvent former des tumeurs transplantables présentant une histologie de cancer du poumon à petites cellules non typhique.
- Tissu
- Poumon
- Maladie
- Carcinome pulmonaire à petites cellules
- Site métastatique
- Effusion pleurale
- Synonymes
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Classification
- Organisme
- Humain
- Sexe
- Homme
- Propriétés de croissance
- Adepte
- Niveau de biosécurité
- 1
03Caractéristiques
- Morphologie
- De type épithélial
- Tumorigène
- Oui, chez la souris nude (les cellules forment des tumeurs transplantables avec une histologie SCLC non-typique).
04Identifiants
- Référence
- NCI-H446 (numéro de catalogue Cytion 305049)
- Numéro d'identification fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Manipulation et culture
- Milieu de culture
- RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
- Atmosphère d'incubation
37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.
- Compléments alimentaires
- Compléter le milieu avec 10 % de FBS, ajouter 2,5 g/L de glucose, 10 mM d'HEPES et 1,0 mM de pyruvate de sodium
- Réactif de dissociation
- Accutase
- Repiquage
- Rassembler les cellules en suspension dans un tube de 15 ml et laver délicatement les cellules adhérentes avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium (utiliser 3-5 ml pour les flacons T25 et 5-10 ml pour les flacons T75). Appliquer Accutase (1-2 ml pour les flacons T25, 2,5 ml pour les flacons T75) en veillant à couvrir entièrement la couche cellulaire. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 10 minutes. Après l'incubation, combiner et centrifuger la suspension et les cellules adhérentes. Après centrifugation, remettre soigneusement en suspension le culot cellulaire et transférer la suspension cellulaire dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais.
- Renouvellement des fluides
- 2 à 3 fois par semaine
- Décongélation et mise en culture
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Contrôle qualité et cryoconservation
- Stérilité
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.
Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.
- Milieu de congélation
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
- Conditions de stockage
Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.
- Conditions de livraison
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
07Donateur
- Âge du donneur
- 61 ans
- Origine ethnique
- Européen
08Aspects juridiques et sécurité
- Consignes de sécurité
- Lorsque l'on envisage de stocker un cryovial dans l'azote liquide en vue d'une décongélation ultérieure, il est obligatoire de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Des gants et des vêtements de protection appropriés sont indispensables, et l'utilisation d'un masque facial ou de lunettes de sécurité est requise pendant le transfert des échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d'azote liquide. Ceci afin de réduire le risque de blessures dues à l'explosion potentielle des cryoviaux lors de leur retrait, qui peut entraîner la projection de fragments tranchants.
- Garantie
Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit
Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie
- Un accord de transfert de matériel est requis
- Oui
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