.jpg)
- Тъкан
- Бял дроб
- Заболяване
- Дребноклетъчен карцином на белия дроб
- Място на метастазите
- Плеврална ефузия
- Синоними
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Документи
NCI-H446
Cell line · Номер на продукта 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Персонализиране / Препоръки
- NCI-H446Cell line€430.00
Препоръчани (най-новата партида)
01Обща информация
- Описание
- Тази клетъчна линия е създадена през 1982 г. от D. Carney, A.F. Gazdar и сътрудници от плевралната течност на пациент с дребноклетъчен рак на белия дроб. Първоначалната морфология на тумора не е била характерна за дребноклетъчния рак на белия дроб. Клетъчната линия е вариант на дребноклетъчния рак на белия дроб по биохимия и морфология и експресира неврон-специфична енолаза, както и мозъчния изоензим на креатинкиназата. В клетъчната линия не са открити L-DOPA декарбоксилаза, бомбезин, вазопресин, окситоцин или пептид, освобождаващ гастрин. Тази клетъчна линия показва 20 пъти по-висока степен на амплификация на c-myc ДНК и 15 пъти по-висока степен на c-myc РНК. Клетъчната линия първоначално е размножена в безсерумна среда RPMI 1640, допълнена с 10 nM хидрокортизон, 5 микрограма/ml инсулин, 10 микрограма/ml трансферин, 10 nM 17-бета-естрадиол и 30 nM натриев селенит. Клетките могат да образуват трансплантируеми тумори с нетипичен дребноклетъчен рак на белия дроб.
- Тъкан
- Бял дроб
- Заболяване
- Дребноклетъчен карцином на белия дроб
- Място на метастазите
- Плеврална ефузия
- Синоними
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Класификация
- Организъм
- Човек
- Секс
- Мъж
- Свойства, свързани с растежа
- Привърженик
- Ниво на биологична безопасност
- 1
03Характеристики
- Морфология
- Подобни на епител
- Туморогенен
- Да, при голи мишки (клетките образуват тумори за трансплантация с нетипична хистология на SCLC).
04Идентификатори
- Източник
- NCI-H446 (каталожен номер 305049 на Cytion)
- Данъчен идентификационен номер в NCBI
- 9606
- Целозавър
- CVCL_1562
05Обработка и отглеждане
- Хранителна среда
- RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
- Атмосфера за инкубация
37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.
- Добавки
- Допълнете средата с 10% FBS, добавете 2,5 g/L глюкоза, 10 mM HEPES и 1,0 mM натриев пируват
- Реагент за дисоциация
- Accutase
- Пресаждане
- Съберете суспендираните клетки в 15-милилитрова епруветка и внимателно промийте прилепналите клетки с PBS без калций и магнезий (използвайте 3-5 ml за колби Т25 и 5-10 ml за колби Т75). Нанесете Accutase (1-2 ml за колби T25 и 2,5 ml за колби T75), като се уверите, че покрива изцяло клетъчния слой. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 10 минути. След инкубацията комбинирайте и центрофугирайте суспензията и адхезивните клетки. След центрофугирането внимателно ресуспендирайте клетъчната пелета и прехвърлете клетъчната суспензия в нови колби, съдържащи свежа среда.
- Обновяване на течността
- 2 до 3 пъти седмично
- Размразяване и култивиране
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Контрол на качеството и криоконсервация
- Стерилност
Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.
За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.
- Среда за замразяване
- Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
- Условия за съхранение
За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.
- Условия за доставка
Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
07Дарител
- Възраст на донора
- 61 години
- Етническа принадлежност
- Европейски
08Правни въпроси и безопасност
- Мерки за безопасност
- Когато планирате да съхранявате криопрепарат в течен азот за бъдещо размразяване, е задължително да спазвате строги мерки за безопасност. Подходящите защитни ръкавици и облекло са от съществено значение, а по време на прехвърлянето на замразени проби към или от резервоара с течен азот е необходимо да се използва маска за лице или предпазни очила. Това се прави, за да се намали рискът от нараняване от потенциални експлозии на криовиолите при изваждането им, които могат да доведат до изхвърляне на остри фрагменти.
- Гаранция
Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа
За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация
- Необходимо е споразумение за прехвърляне на материали
- Да
.jpg)
.jpg)
.jpg)
