.jpg)
- Audinys
- Plaučiai
- Liga
- Plaučių smulkiųjų ląstelių karcinoma
- Metastazių vieta
- Pleuros efuzija
- Sinonimai
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Dokumentai
NCI-H446
Cell line · Prekės numeris 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- NCI-H446Cell line€430.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
- Šią ląstelių liniją 1982 m. sukūrė D. Carney, A. F. Gazdaras ir bendradarbiai iš paciento, sergančio smulkialąsteliniu plaučių vėžiu, pleuros skysčio. Pradinė naviko morfologija nebuvo būdinga smulkialąsteliniam plaučių vėžiui. Ląstelių linija pagal biochemiją ir morfologiją yra smulkialąstelinio plaučių vėžio variantas, ji ekspresuoja neuronams specifinę enolazę ir smegenų kreatinkinazės izofermentą. Ląstelių linijoje neaptikta L-DOPA dekarboksilazės, bombesino, vazopresino, oksitocino ar gastriną atpalaiduojančio peptido. Ši ląstelių linija pasižymi 20 kartų didesniu c-myc DNR amplifikacijos laipsniu ir 15 kartų didesniu c-myc RNR amplifikacijos laipsniu. Ląstelių linija iš pradžių buvo dauginama RPMI 1640 terpėje be serumo, papildytoje 10 nM hidrokortizono, 5 mikrogramais/ml insulino, 10 mikrogramų/ml transferino, 10 nM 17-beta-estradiolio ir 30 nM natrio selenito. Ląstelės gali suformuoti transplantuojamus netipinio smulkiųjų ląstelių plaučių vėžio histologinius navikus.
- Audinys
- Plaučiai
- Liga
- Plaučių smulkiųjų ląstelių karcinoma
- Metastazių vieta
- Pleuros efuzija
- Sinonimai
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Vyras
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Į epitelį panašus
- Tumorogeninis
- Taip, nuogoms pelėms (ląstelės suformuoja transplantuojamus navikus, kurių histologija nėra tipiška SCLC).
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- NCI-H446 (Cytion katalogo numeris 305049)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS, pridėkite 2,5 g/l gliukozės, 10 mM HEPES ir 1,0 mM natrio piruvato
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Surinkite ląstelių suspensiją į 15 ml mėgintuvėlį ir švelniai nuplaukite prilipusias ląsteles PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio (naudokite 3-5 ml T25 kolboms ir 5-10 ml T75 kolboms). Užtepkite "Accutase" (1-2 ml T25 kolboms, 2,5 ml T75 kolboms), kad visiškai padengtumėte ląstelių sluoksnį. Leiskite ląstelėms 10 minučių inkubuotis kambario temperatūroje. Po inkubacijos sumaišykite ir centrifuguokite suspensiją ir prilipusias ląsteles. Po centrifugavimo atsargiai resuspenduokite ląstelių granules ir perkelkite ląstelių suspensiją į naujas kolbas su šviežia terpe.
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
07Donoras
- Donoro amžius
- 61 metai
- Etninė priklausomybė
- Europos
08Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip
.jpg)
.jpg)
.jpg)
