.jpg)
- Tisu
- Paru-paru
- Penyakit
- Karsinoma sel kecil paru-paru
- Lokasi metastasis
- Efusi Pleura
- Sinonim
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Dokumen
NCI-H446
Cell line · Nomor produk 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Penyesuaian / Rekomendasi
- NCI-H446Cell line€430.00
Direkomendasikan (stok terbaru)
01Informasi umum
- Deskripsi
- Garis sel ini didirikan pada tahun 1982 oleh D. Carney, A.F. Gazdar dan rekan-rekannya dari cairan pleura pasien dengan kanker sel kecil paru-paru. Morfologi tumor aslinya tidak khas untuk kanker paru sel kecil. Garis sel adalah varian kanker paru-paru sel kecil dalam biokimia dan morfologi, dan mengekspresikan enolase spesifik neuron serta isoenzim otak kreatin kinase. Tidak ada satupun dari L-DOPA dekarboksilase, bombesin, vasopresin, oksitosin, atau peptida pelepas gastrin yang terdeteksi dalam garis sel. Garis sel ini menunjukkan tingkat amplifikasi DNA c-myc 20 kali lipat lebih tinggi dan tingkat c-myc RNA 15 kali lipat lebih tinggi. Garis sel ini awalnya diperbanyak dalam media RPMI 1640 bebas serum yang dilengkapi dengan 10 nM hidrokortison, 5 mikrogram / mL insulin, 10 mikrogram / mL transferin, 10 nM 17-beta-estradiol, dan 30 nM natrium selenit. Tumor yang dapat ditransplantasikan dengan histologi kanker paru sel kecil yang tidak khas dapat dibentuk oleh sel.
- Tisu
- Paru-paru
- Penyakit
- Karsinoma sel kecil paru-paru
- Lokasi metastasis
- Efusi Pleura
- Sinonim
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Laki-laki
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti Epitel
- Tumorigenik
- Ya, pada tikus telanjang (Sel-sel membentuk tumor yang dapat ditransplantasikan dengan histologi SCLC yang tidak khas).
04Pengidentifikasi
- Referensi
- NCI-H446 (Nomor katalog Cytion 305049)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Lengkapi media dengan 10% FBS, tambahkan 2,5 g/L glukosa, 10 mM HEPES dan 1,0 mM Natrium piruvat
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Kumpulkan sel suspensi dalam tabung 15 ml dan cuci sel yang melekat dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium (gunakan 3-5 ml untuk labu T25 dan 5-10 ml untuk labu T75). Oleskan Accutase (1-2 ml untuk labu T25, 2,5 ml untuk labu T75) untuk memastikan cakupan penuh lapisan sel. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 10 menit. Setelah inkubasi, gabungkan dan sentrifugasi suspensi dan sel yang melekat. Setelah sentrifugasi, resuspensi pelet sel dengan hati-hati dan pindahkan suspensi sel ke dalam labu baru yang berisi medium segar.
- Pergantian cairan
- 2 hingga 3 kali per minggu
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
07Donatur
- Usia donor
- 61 tahun
- Etnis
- Eropa
08Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Diperlukan Perjanjian Transfer Material
- Ya
.jpg)
.jpg)
.jpg)
