.jpg)
- Kudos
- Keuhkot
- Sairaus
- Keuhkojen pienisoluinen karsinooma
- Metastaasikohde
- Pleuraeffuusio
- Synonyymit
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Asiakirjat
NCI-H446
Cell line · Tuotenumero 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Räätälöinti / Suositukset
- NCI-H446Cell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
- D. Carney, A.F. Gazdar ja kumppanit perustivat tämän solulinjan vuonna 1982 pienisoluista keuhkosyöpää sairastavan potilaan pleuranesteestä. Alkuperäinen kasvaimen morfologia ei ollut pienisoluiselle keuhkosyövälle ominainen. Solulinja on biokemialtaan ja morfologialtaan pienisoluisen keuhkosyövän muunnos, ja se ilmentää neuronispesifistä enolaasia sekä aivojen kreatiinikinaasin isoentsyymiä. Solulinjassa ei ole havaittu L-DOPA-dekarboksylaasia, bombesiinia, vasopressiinia, oksitosiinia tai gastriinia vapauttavaa peptidiä. Tässä solulinjassa c-myc-DNA:n monistumisaste on 20-kertainen ja c-myc-RNA:n 15-kertainen. Solulinja kasvatettiin alun perin seerumittomassa RPMI 1640 -mediassa, jota täydennettiin 10 nM hydrokortisonilla, 5 mikrogrammaa/ml insuliinilla, 10 mikrogrammaa/ml transferriinillä, 10 nM 17-beta-estradioolilla ja 30 nM natriumseleniitillä. Soluista voidaan muodostaa siirrettäviä kasvaimia, joiden histologia on epätyypillinen pienisoluinen keuhkosyöpä.
- Kudos
- Keuhkot
- Sairaus
- Keuhkojen pienisoluinen karsinooma
- Metastaasikohde
- Pleuraeffuusio
- Synonyymit
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltaiset
- Kasvaimia aiheuttava
- Kyllä, alastomilla hiirillä (solut muodostavat siirrettäviä kasvaimia, joiden histologia on epätyypillinen SCLC).
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- NCI-H446 (Cytionin luettelonumero 305049)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään väliaine 10 %:lla FBS:ää, lisätään 2,5 g/l glukoosia, 10 mM HEPES:ää ja 1,0 mM natriumpyruvaattia
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Kerää suspensiosolut 15 ml:n putkeen ja pese kiinni olevat solut varovasti PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml T25-pulloissa ja 5-10 ml T75-pulloissa). Levitä Accutasea (1-2 ml T25-pulloihin, 2,5 ml T75-pulloihin) varmistaen, että solukerros peittyy kokonaan. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 10 minuuttia. Inkuboinnin jälkeen yhdistetään ja sentrifugoidaan sekä suspensio että adherentit solut. Sentrifugoinnin jälkeen solupelletti suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensio uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
07Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 61 vuotta
- Etnisyys
- Eurooppalainen
08Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
.jpg)
.jpg)
.jpg)
