İçeriğe atla
NCI-H446
Doku
Akciğer
Hastalık
Akciğer küçük hücreli karsinomu
Metastaz yeri
Plevral Efüzyon
Eş anlamlılar
NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446

NCI-H446

Cell line · Ürün numarası 305049

This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama
Bu hücre hattı 1982 yılında D. Carney, A.F. Gazdar ve arkadaşları tarafından küçük hücreli akciğer kanseri olan bir hastanın plevral sıvısından oluşturulmuştur. Orijinal tümör morfolojisi küçük hücreli akciğer kanseri için karakteristik değildi. Hücre hattı, biyokimya ve morfoloji açısından küçük hücreli akciğer kanserinin bir varyantıdır ve nöron spesifik enolazın yanı sıra kreatin kinazın beyin izoenzimini de eksprese etmektedir. Hücre hattında L-DOPA dekarboksilaz, bombesin, vazopressin, oksitosin veya gastrin salgılatıcı peptid tespit edilmemiştir. Bu hücre hattı 20 kat daha yüksek c-myc DNA amplifikasyonu ve 15 kat daha yüksek c-myc RNA derecesi sergilemektedir. Hücre hattı orijinal olarak 10 nM hidrokortizon, 5 mikrogram/mL insülin, 10 mikrogram/mL transferrin, 10 nM 17-beta-estradiol ve 30 nM sodyum selenit ile desteklenmiş serumsuz RPMI 1640 ortamında çoğaltılmıştır. Hücreler tarafından tipik olmayan küçük hücreli akciğer kanseri histolojisine sahip nakledilebilir tümörler oluşturulabilir.
Doku
Akciğer
Hastalık
Akciğer küçük hücreli karsinomu
Metastaz yeri
Plevral Efüzyon
Eş anlamlılar
  • NCI-H446
  • H-446
  • NCI-446
  • NCIH446

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel Benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde (Hücreler, tipik olmayan SCLC histolojisine sahip nakledilebilir tümörler oluşturur).

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCI-H446 (Cytion katalog numarası 305049)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1562

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile destekleyin, 2,5 g/L glikoz, 10 mM HEPES ve 1,0 mM Sodyum piruvat ekleyin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Süspansiyon hücrelerini 15 ml'lik bir tüpte toplayın ve yapışık hücreleri kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile nazikçe yıkayın (T25 şişeleri için 3-5 ml ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın). Accutase uygulayın (T25 şişeler için 1-2 ml, T75 şişeler için 2,5 ml) ve hücre tabakasının tamamen kaplandığından emin olun. Hücreleri 10 dakika boyunca oda sıcaklığında inkübasyona bırakın. İnkübasyonun ardından, hem süspansiyonu hem de yapışık hücreleri birleştirin ve santrifüjleyin. Santrifüjden sonra hücre peletini dikkatlice yeniden süspanse edin ve hücre süspansiyonunu taze ortam içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
61 yıl
Etnik köken
Avrupa