Μετάβαση στο περιεχόμενο
NCI-H446
Ιστός
Πνεύμονας
Ασθένεια
Μικροκυτταρικό καρκίνωμα του πνεύμονα
Θέση μετάστασης
Υπεζωκοτική συλλογή
Συνώνυμα
NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446

Έγγραφα

NCI-H446

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305049

This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Αυτή η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε το 1982 από τους D. Carney, A.F. Gazdar και συνεργάτες από το πλευριτικό υγρό ενός ασθενούς με μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα. Η αρχική µορφολογία του όγκου δεν ήταν χαρακτηριστική του µικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύµονα. Η κυτταρική σειρά αποτελεί παραλλαγή του μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα ως προς τη βιοχημεία και τη μορφολογία και εκφράζει τη νευροειδική ενολάση καθώς και το εγκεφαλικό ισοένζυμο της κινάσης της κρεατίνης. Στην κυτταρική σειρά δεν ανιχνεύθηκε καμία από τις ουσίες L-DOPA αποκαρβοξυλάση, βομβεσίνη, αγγειοπιεσίνη, ωκυτοκίνη ή πεπτίδιο απελευθέρωσης γαστρίνης. Η εν λόγω κυτταρική σειρά παρουσιάζει 20 φορές υψηλότερο βαθμό ενίσχυσης του c-myc DNA και 15 φορές υψηλότερο βαθμό c-myc RNA. Η κυτταρική σειρά πολλαπλασιάστηκε αρχικά σε μέσο RPMI 1640 χωρίς ορό, συμπληρωμένο με 10 nM υδροκορτιζόνης, 5 μικρογραμμάρια/ml ινσουλίνης, 10 μικρογραμμάρια/ml τρανσφερρίνης, 10 nM 17-β-οιστραδιόλης και 30 nM σεληνίτη νατρίου. Από τα κύτταρα μπορούν να σχηματιστούν μεταμοσχεύσιμοι όγκοι με ιστολογία μη τυπικού μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα.
Ιστός
Πνεύμονας
Ασθένεια
Μικροκυτταρικό καρκίνωμα του πνεύμονα
Θέση μετάστασης
Υπεζωκοτική συλλογή
Συνώνυμα
  • NCI-H446
  • H-446
  • NCI-446
  • NCIH446

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια (τα κύτταρα σχηματίζουν μεταμοσχεύσιμους όγκους με μη τυπική ιστολογία SCLC).

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
NCI-H446 (αριθμός καταλόγου Cytion 305049)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1562

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS, προσθέστε 2,5 g/L γλυκόζης, 10 mM HEPES και 1,0 mM πυρουβικού νατρίου
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Συγκεντρώστε τα εναιωρήματα σε ένα σωληνάριο των 15 ml και πλύνετε απαλά τα προσκολλημένα κύτταρα με PBS χωρίς ασβέστιο και μαγνήσιο (χρησιμοποιήστε 3-5 ml για φιάλες T25 και 5-10 ml για φιάλες T75). Εφαρμόστε Accutase (1-2 ml για φιάλες T25, 2,5 ml για φιάλες T75) εξασφαλίζοντας πλήρη κάλυψη της κυτταρικής στιβάδας. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 10 λεπτά. Μετά την επώαση, συνδυάστε και φυγοκεντρίστε τόσο το εναιώρημα όσο και τα προσκολλημένα κύτταρα. Μετά τη φυγοκέντρηση, ανασυγκεντρώστε προσεκτικά το κυτταρικό σφαιρίδιο και μεταφέρετε το εναιώρημα κυττάρων σε νέες φιάλες που περιέχουν φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
61 χρόνια
Εθνικότητα
Ευρωπαϊκό

Ίσως χρειαστείτε επίσης